[发明专利]生活饮用水中菌落总数能力验证样品及其制备方法

权利要求书

1.生活饮用水中菌落总数能力验证样品，其特征是：目标菌群由金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌和弗氏柠檬酸杆菌组成。

2.根据权利要求1所述的生活饮用水中菌落总数能力验证样品，其特征是：所述样品以海藻糖、脱脂奶粉和无菌水为基质，其中海藻糖的体积分数为12％、脱脂奶粉的体积分数为0.1%。

3.根据权利要求1或2所述的生活饮用水中菌落总数能力验证样品，其特征是：所述样品中目标菌群的目标浓度为10²～10³ CFU/100mL。

4.根据权利要求1所述的生活饮用水中菌落总数能力验证样品的制备方法，其特征是：包括样品添加菌株的选择、冻干保护剂的配制、样品冻干、样品的均匀性和稳定性试验四个步骤，其中样品冻干过程为：菌株复苏传代—增菌—菌悬液配制—冻干和包装—储存，具体过程为：

（1）菌株复苏传代

将标准菌株接种到营养琼脂斜面培养基中，在36±1℃下使其复苏和生长，并对复苏的菌株进行鉴定；

（2）增菌

目标菌群培养至对数生长期末，从斜面刮取菌落，加到10mL的冻干保护剂中制成相应单一菌种的菌液；

（3）菌悬液配制

将上一过程得到的菌液与冻干保护剂混合，按目标菌群的目标浓度10²～10³ CFU/100mL配制菌悬液，按1:1体积比混合形成菌悬液，置于磁力搅拌器上不断搅拌下分装到样品瓶中，加上瓶塞，但要留有空隙，不要盖实；

（4）冻干和包装

将装有混合菌悬液的样品瓶开盖放入冻干机中，冷冻干燥40～50h，当样品冷冻干燥结束后，直接进行箱内加塞，关闭机器，样品瓶中样品为真空状态；

（5）储存

将样品放置在-18℃条件下避光保存，从全部样品中随机挑选样品进行均匀性和稳定性试验，满足要求后发放给参试实验室进行实验室间比对。

5.根据权利要求4所述的生活饮用水中菌落总数能力验证样品的制备方法，其特征是：所述冻干保护剂为含有海藻糖和脱脂奶粉的无菌水，其中体积分数分别为：海藻糖12%、脱脂奶粉0.1%。

6.根据权利要求4所述的生活饮用水中菌落总数能力验证样品的制备方法，其特征是：所述样品的均匀性和稳定性试验按照CNAS—GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》进行。