[发明专利]一种利用化学酶法制备苯烯莫德的方法

权利要求书

1.一种利用化学酶法制备苯烯莫德的方法，其特征在于：先以有机合成的方法合成中间体1和中间体2，再利用酮酶StlD和芳香化酶StlC催化中间体1和中间体2，合成苯烯莫德；包括以下步骤：

(1)按照摩尔份数计，先将1份异戊酸与0.5～5份丙二酸亚异丙酯混合后放入反应器中，加入500～1500份二氯乙烷，搅拌均匀，在N，N'-二环己基碳二亚胺与4-二甲氨基吡啶的催化作用下，在20～25℃下反应2～4h，然后减压蒸馏除去二氯乙烷，并用硅胶柱分离出产物，接着将产物和0.5～5份N-乙酰基半胱胺放入500～1500份甲苯中，在75～85℃下反应3～6h，最后减压蒸馏除去甲苯，并经过硅胶柱分离后，放在TLC板上，在波长为256nm的紫外线照射下，析出的产物即为中间体1；

(2)按照摩尔份数计，将1份(2E，4E)-5-苯基-2，4-戊二烯酸与0.5～5份N-乙酰基半胱胺放入反应器中，加入500～1500份二氯乙烷，搅拌均匀，在20～25℃下反应2～5h，然后减压蒸馏除去二氯乙烷，用硅胶柱分离后，放在TLC板上，在波长为256nm的紫外线照射下，析出的产物即为中间体2；

(3)按照摩尔分数计，将1份中间体1、1份中间体2、0.005～0.05份酮酶StlD和0.005～0.05份芳香化酶StlC放入反应器中，加入pH值为6～9的缓冲液，搅拌均匀后，在20～55℃下反应1～5h，得到反应溶液；

(4)将按体积比为1：1的乙酸乙酯萃取液和反应溶液混合后，对反应溶液进行萃取，收集有机相，并用无水氯化钙进行干燥，经过减压蒸馏除去乙酸乙酯后，即得苯烯莫德。

有机合成的方法按照以下路线进行反应：

(1)

(2)

(3)

2.根据权利要求1所述的一种利用化学酶法制备苯烯莫德的方法，其特征在于：步骤(3)所述的酮酶StlD为一种来源于细菌Photohabdus luminesces的酮酶，氨基酸序列为SQEID NO1。

3.根据权利要求1所述的一种利用化学酶法制备苯烯莫德的方法，其特征在于：步骤(3)所述的芳香化酶StlC为一种来源于细菌Photohabdus luminesces的芳香化酶，氨基酸序列为SQEID NO2。