[发明专利]一种精氨酸激酶的检测方法有效
| 申请号： | 201710362795.4 | 申请日： | 2017-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN107179309B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 赵玉芬;蔡华欢;黄碧玲;林荣灿;许鹏翔;刘艳 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | G01N21/65 | 分类号： | G01N21/65 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 激酶 精氨酸 检测 底物肽 纳米金 水中 柠檬酸钠还原法 细胞内信号 标准曲线 合成胶体 拉曼光谱 水浴锅 除掉 混匀 传导 蛋白质 沉淀 游离 测试 | ||
1.一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于包括以下步骤：
1)利用柠檬酸钠还原法合成胶体纳米金，再加入4-MBA，然后通过离心除掉游离的4-MBA，将沉淀重新分散在超纯水中；
2)将底物肽溶于水中，再分别加入ATP和MgCl2，向底物肽中加入精氨酸激酶，得反应液后，置于水浴锅中恒温；
3)将步骤2)的反应液加到纳米金中，混匀后进行拉曼光谱的测试，并最终得到标准曲线。
2.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述合成胶体纳米金是合成尺寸为30nm的胶体纳米金。
3.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述再加入4-MBA过夜。
4.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述将底物肽溶于水中的质量浓度为1mg/mL，底物肽为2μL底物肽。
5.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述再分别加入ATP和MgCl2是加入1μLATP和1μL MgCl2。
6.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述反应液的体积为100μL。
7.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述置于水浴锅中恒温的温度为40℃，水浴锅中恒温的时间为3h。
8.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤3)中，所述反应液的浓度为5μL。
9.如权利要求1所述一种精氨酸激酶的检测方法，其特征在于在步骤3)中，纳米金的体积浓度为200μL。
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