[发明专利]披碱草叶片中内生真菌检测方法在审

申请号：	201710362319.2	申请日：	2017-05-22
公开（公告）号：	CN108929894A	公开（公告）日：	2018-12-04
发明（设计）人：	邵万均	申请（专利权）人：	邵万均
主分类号：	C12Q1/04	分类号：	C12Q1/04
代理公司：	暂无信息	代理人：	暂无信息
地址：	210000 江苏省南京市***	国省代码：	江苏;32
权利要求书：	查看更多	说明书：	查看更多
摘要：
搜索关键词：	叶片放入叶肉内生真菌叶片表皮检测小块清洗次氯酸钠溶液染色剂溶液检测结果酒精溶液绿色叶片清水清洗叶片样品剪除晾干植株盖玻片表皮剪去取下小段压平浸泡挤压玻璃
钻瓜网技术展会专利词库专利权人专利榜在售专利公布日期热门专利

【说明书】：

本发明公开了一种披碱草叶片中内生真菌检测方法，将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；将叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；将叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；将叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；将叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；将盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2至3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；对披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。本发明具有检测准确性高、操作简单、对叶表皮和叶肉分别进行内生真菌检测的特点。

技术领域

本发明涉及真菌检测领域，尤其涉及一种披碱草叶片中内生真菌检测方法。

背景技术

披碱草，拉丁学名：ElymusdahuricusTurcz.禾本科、披碱草属的多年生草本植物，秆疏丛，直立，基部膝曲。叶鞘光滑无毛；叶片扁平，稀可内卷，上面粗糙，下面光滑，有时呈粉绿色，穗状花序直立，较紧密，穗轴边缘具小纤毛，小穗绿色，成熟后变为草黄色，颖披针形或线状披针形，外稃披针形，全部密生短小糙毛，先端延伸成芒，芒粗糙，成熟后向外展开；内稃与外稃等长，先端截平，脊上具纤毛，至基部渐不明显，脊间被稀少短毛。

目前，已经在披碱草中发现内生真菌，但对其叶片还没有具体的内生真菌检测方法。

发明内容

发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种检测准确性高、操作简单、对叶表皮和叶肉分别进行内生真菌检测的披碱草叶片中内生真菌检测方法。

技术方案：本发明所述的披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，

(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；

(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；

(3)将步骤(2)获得的叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；

(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；

(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；

(6)将盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2至3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；

(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。

其中，所述的步骤(3)通过高温消毒后的剪刀对叶片进行剪切。