[发明专利]一种快速检测嗜肺军团菌的CPA引物组及其检测方法

权利要求书

1.一种检测嗜肺军团菌的CPA引物组，其特征在于，所述引物组包含一条交叉引物CP，一对剥离引物DPF/DPR和一对检测引物DF/DR，其序列依次如SEQ ID NO：1～5所示。

2.权利要求1所述CPA引物组在检测和/或鉴定嗜肺军团菌中的应用。

3.权利要求1所述CPA引物组在制备嗜肺军团菌检测试剂或试剂盒中的应用。

4.一种快速检测嗜肺军团菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.以待测样品基因组DNA为模板，利用权利要求1所述引物组进行CPA扩增；

S2.根据扩增结果判断待测样品中是否含有嗜肺军团菌。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S1所述CPA扩增的反应体系为：10× Isothermal Amplification Buffer 2μL，100mMMgSO₄1.2μL，10mMdNTP mix 0.8μL，Bst DNA聚合酶8U，10μM交叉引物CP 1.2μL，10μM剥离引物DPF、DPR各0.2μL，10μM检测引物DF、DR各1μL，模板DNA 1μL，加入ddH₂O补足20μL；步骤S1所述CPA扩增的反应条件为：60～65℃，60min；85℃，10min。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S2所述根据扩增结果判断待测样品中是否含有嗜肺军团菌的具体方法为：利用电泳法或荧光染料法对CPA扩增产物进行检测，根据检测结果判断待测样品中是否含有嗜肺军团菌。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，结果的判断标准为：

电泳法：若扩增产物呈现CPA特有的梯形条带，则为阳性，表示待测样品中含有嗜肺军团菌；若扩增产物未出现条带，则为阴性，表示待测样品中不含有嗜肺军团菌；

荧光染料法：若呈现绿色荧光，则为阳性，表示待测样品中含有嗜肺军团菌；若呈现橙色，则为阴性，表示待测样品中不含有嗜肺军团菌。

8.权利要求4～7任一所述的方法在检测和/或鉴定嗜肺军团菌中的应用。

9.一种快速检测嗜肺军团菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述CPA引物组。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含CPA扩增反应所需试剂。