[发明专利]一种提高幽门螺杆菌致病菌株抗体检出率的改性胶乳免疫比浊测定试剂盒

说明书

本发明涉及一种提高幽门致病菌株抗体检出率的改性胶乳免疫比浊试剂盒，该试剂盒由分别放置的试剂1，试剂2、校准品、低值质控品和高值质控品组成。通过前期对幽门螺杆菌菌株进行分型鉴定，提高了致病性菌株的检出率；抗原包被过程中选用4‑(4,6‑二甲氧基三嗪‑2‑基)‑4‑甲基吗啉盐酸盐(DMTMM)作为超支化聚缩水甘油醚修饰的胶乳微球与抗原结合的交联剂，在增加偶联效率的同时利用超支化聚缩水甘油醚的亲水特性保护偶联抗原构象，提高抗原抗体特异性结合；试剂配制过程中选择了一种新型的表面活性剂十二烷基葡萄糖苷，在与其他活性剂、稳定剂、保护剂及防腐剂的共同作用下，有效提高了试剂脂类杂质及杂质蛋白清除能力。

技术领域

本发明属医学检验技术领域，涉及一种提高幽门螺杆菌致病菌株抗体检出率的改性胶乳免疫比浊测定试剂盒。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称H.pylori)是一种单极，多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌，呈格兰染色阴性，在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。

幽门螺杆菌是胃癌高危因子之一。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC)将其定为I类致癌原。流行病学显示，全球几乎有一半的人口感染此菌，发展中国家甚至高达60％～70％。因此，幽门螺杆菌感染是世界各国需要面对的公共卫生问题。

幽门螺杆菌主要分为两种亚型，其中I型表达VacA，CagA等基因，被认为是导致胃部疾病的主要类型。而I型中的东亚型(EAS)导致胃癌的比例更高，相比未感染人群，发病率可高出20倍。

目前幽门螺杆菌从检测手段上分为侵入性和非侵入性两大类。

侵入法虽然检测准确，但此项检测一般需要进入病人胃部，给患者带来较大痛苦；且该类方法操作复杂，检测周期较长，不利于疾病的快速诊断；因此不适用于幽门螺杆菌的早期诊断与治疗。

非侵入性检测避免了因反复做胃镜带来的痛苦或发生的其它类型的感染，试验方法主要有尿素呼吸试验和血清学法。尿素呼吸试验虽然灵敏度高，且可实现定量测定，但有一定的放射危害，且检测费用昂贵。血清学法中的酶联免疫、免疫印迹法和胶体金法虽提供了便捷手段，但检测速度慢且不利于大批量检测。胶乳免疫比浊法检测幽门螺杆菌不仅简便、快速、可实现批量检测，而且是定量检测的血清学法，由于该方法在幽门螺杆菌检测中的诸多优点，引发了国内广泛的研究热潮，目前国内已公布的发明专利如下：

但该方法目前仍存在以下技术缺陷：1)与临床通用诊断标准比较敏感度，特异性及精确度较低；2)交联剂及胶乳微球在抗原交联过程中的稳定性、特异性及偶联效率仍有待改进；3) 试剂中保护剂、稳定剂及表面活性剂的选用、配比及与微球的协同作用直接影响检测的试剂的灵敏度，线性，特异性及试剂稳定性；为便于临床推广及确保检测结果的可信度，需要进一步提高现有技术的灵敏度，线性，特异性及稳定性。

发明内容

本发明为了克服上述现有技术缺陷，提供了一种高幽门螺杆菌致病菌抗体检出率，特异性强，稳定性好，灵敏度高，线性范围广的幽门螺杆菌致病菌株抗体测定试剂盒，以及试剂盒的制备方法。

本发明采取的技术方案是：通过将前期分型的东亚幽门螺杆菌菌株抗原结合于改性后的胶乳颗粒上提高血清中的幽门致病菌抗体检测率及抗原抗体结合的特异性。

本发明是通过以下措施实现的：

幽门螺杆菌致病菌株抗体测定试剂盒，包含试剂1、试剂2、校准品、低值质控品和高值质控品；其各组分及浓度范围为：

试剂1：

试剂2：

校准品：