[发明专利]含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料及其在糖肽富集中的应用

说明书

本发明属于纳米技术领域，具体涉及一种含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料，所述纳米材料包括若干硫化铜纳米粒子以及包覆在其表面的含有二羟基苯基的化合物。该方法是先制备各种形状的硫化铜纳米粒子，超声条件下将硫化铜纳米粒子均匀分散到溶剂中制得悬浮液，调节pH＝8.0‑9.0，然后加入含有二羟基苯基的化合物，搅拌反应20‑24小时后，超纯水和乙醇离心清洗产物，最后置于真空干燥箱干燥，得到所述含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料。进而将材料应用于在糖基化蛋白富集分离中。本发明成功将含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米粒子材料与分散固相萃取结合，实现了从复杂样品中对糖基化肽类物质的高选择性和高通量地富集。

技术领域

本发明属于纳米技术领域，具体涉及一种含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料及其在糖肽富集中的应用。

背景技术

许多临床的生物标志物及治疗的靶标都是糖蛋白。定性、定量地分析糖蛋白，对于发现新的疾病诊断标志物及治疗靶标具有非常重要的意义。但是，在实际生物样品中的糖蛋白含量极少，并且糖基化具有微相不均一性，很难用质谱直接进行分析。因此对糖肽样品进行分离和富集非常有必要。目前已有包括凝集素亲和色谱法、苯硼酸法、亲水色谱法、肼化学法和TiO₂亲和法等实现对糖肽的选择性富集，但是各种方法都有其各自的缺陷和问题，还没有一种材料或者方法，能够实现对细胞内蛋白糖基化位点和糖链结构信息的完整捕获和分析。为此，需要开发全新的糖肽富集和分离材料，为糖化学家和糖生物学家提供更为强有力的分析工具。

二氧化硅微球是常见的色谱基质材料，被广泛用于色谱分离，糖肽富集等领域，但是其对酸碱性环境比较敏感，很容易在强碱性(pH大于10)或强酸性(pH小于3)的条件下发生解离和分解，导致其表面化学修饰层的脱落。为了解决这一问题，需要引入对强酸强碱环境耐受性更强的无机基质材料，并对其进行合理的化学修饰，以开发出能在更广泛的pH条件下工作的糖肽富集和分离材料。

硫化铜纳米粒子，具有很高的化学稳定性、独特的光学、电学、催化性能和良好的生物相容性；同时其形貌的多样可控、制备工艺简单，廉价，环境友好等优点使其在太阳能电池、光催化降解污染物、光热治疗、生物标记等领域中获得广泛应用。然而将其作为色谱分离和糖肽富集基质材料的文献，还未有报道。

这是因为硫化铜纳米材料比表面积大，高表面能，粒子之间容易发生团聚，与低表面能的有机分子在相互混合时，两者之间的界面上会出现空隙，难以对其表面进行修饰。另一方面，与常用的氧化物材料不同的是，二氧化硅、金属氧化物等纳米材料容易通过等离子体激发等方式在表面活化出羟基，进而与有机物分子键合进行表面修饰，硫化铜粒子表面不易活化出羟基。因此，相对于大多数氧化物纳米粒子，其具有更优越的耐腐蚀性，光热稳定性。为此，有必要开发一种硫化铜表面修饰方法，并将其开发为糖肽富集材料，提高其在生物领域的应用范围。

发明内容

本发明的目的在于针对上述技术问题，提供一种含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料及其在糖肽富集中的应用。经过含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米粒子，其晶型和特殊形貌不会变化，并引入了生物活性的氨基酸基团，可以与糖肽发生亲水或电荷相互作用，从而实现对糖肽的选择性富集。

本发明为解决上述技术问题所采用的方案为：

含有二羟基苯基的化合物修饰的硫化铜纳米材料，所述纳米材料包括若干硫化铜纳米粒子以及包覆在其表面的含有二羟基苯基的化合物，所述的含有二羟基苯基的化合物为：

上述方案中，所述硫化铜纳米粒子的形貌包括花球状、空心球状、六角片状、棒状、管状、线状、花状、片状或雪花状。

所述的硫化铜纳米材料的制备方法，包括以下步骤：

通过水热法制硫化铜纳米粒子；