[发明专利]毛发中大麻类化合物的提取和检测方法

说明书

本发明涉及一种毛发中大麻类化合物的提取和检测方法。提取方法包括以下步骤：(1)将毛发清洗后，用液氮研磨，得毛发粉末；(2)取研磨后的毛发粉末加入氢氧化钠溶液，进行超声处理，离心，取上清液加入磷酸缓冲液进行缓冲，得毛发处理液；(3)将毛发处理液注入经平衡后的固相萃取柱，依次用乙酸水溶液、甲醇水溶液洗涤杂质，再用正己烷‑乙酸溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得。将收集的洗脱液用LC‑MS/MS的方法进行检测，即可有效检测出毛发中含量甚微的四氢大麻酚及其代谢物的含量。该提取和检测方法操作简单，提取条件温和，提取速度快，释放效率高，检测灵敏度高。

技术领域

本发明涉及生物医药检测技术，特别是涉及一种毛发中大麻类化合物的提取和检测方法。

背景技术

近年来，毛发类的检材因其反应滥用药物信息较全面，为了确认检查对象是否吸毒以及摄毒程度，该类检材经常作为司法鉴定和法庭科学的证据，也被广泛应用于临床毒物学、兴奋剂控制等其他领域。

毛发中成分复杂，存在大量有机成分的干扰物质，为检测毛发中的四氢大麻酚，须建立特异性较强的前处理方法分离提取目标物。因四氢大麻酚及四氢大麻酚酸为偏酸性化合物，其较其他生物碱类毒品更难进入到黑色毛发中，因此其在毛发中的含量较低，需要采用更为有效的前处理条件来释放毛发中的四氢大麻酚，并结合准确有效的检测方法，以提高其检测灵敏度。

韩方等开发了一种测定毛发中THC和THCC的方法：毛发样本经二氯甲烷洗涤后经冷冻粉碎，取20mg粉末样本用1mL甲醇于40℃先超声震荡提取3h，再用液质联用法分析毛发中的四氢大麻酚成分，其线性范围为1ng/mg～20ng/mg。(韩方.建立一种测定毛发中THC和THCC的LC/MS/MS分析方法[J].江西中医药大学学报,2015,27(6):74-76.)。该方法存在以下缺点：1)用甲醇进行提取，提取时间长，提取效率低，时效性较差；2)毛发中四氢大麻酚含量低，1ng/mg的定量下限不能满足实际涉毒案例的检测需求；3)毛发中四氢大麻酚酸的含量较四氢大麻酚的含量更低，毛发中四氢大麻酚酸1ng/mg～20ng/mg的线性范围不能和实际涉毒案例相匹配；4)单次实验毛发的取样量较大，增加了样本的采集量。

发明内容

基于此，本发明提供了一种毛发中大麻类化合物的提取方法，该提取方法条件较为温和，提取时间短，提取效率高，特异性强。

具体技术方案如下：

一种毛发中大麻类化合物的提取方法，包括以下步骤：

(1)将毛发清洗后，用液氮研磨，得毛发粉末；

(2)取研磨后的毛发粉末加入氢氧化钠溶液，进行超声处理，离心，取上清液加入磷酸缓冲液进行缓冲，得毛发预处理液；

(3)将毛发预处理液注入经平衡后的固相萃取柱，依次用乙酸水溶液、甲醇水溶液洗涤杂质，再用正己烷-乙酸溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述氢氧化钠溶液的浓度为0.8～1.2mol/L。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述氢氧化钠溶液与所述毛发粉末的配比为1mL:5～8g。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述超声处理的温度为37～80℃，时间为5～60min。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述超声处理的温度为65～75℃，时间为10～20min。

在其中一些实施例中，步骤(2)所述磷酸缓冲液的pH为5.5-6.5；及/或步骤(2)所述磷酸缓冲液与所述上清液的体积比为1:2.5～3.5。

在其中一些实施例中，步骤(3)所述固相萃取柱依次经过甲醇、醋酸水溶液进行平衡，所述醋酸水溶液的浓度为0.08～0.12mol/L。