[发明专利]一种头孢菌素发酵液中还原糖的测定方法有效
申请号: | 201710286522.6 | 申请日: | 2017-04-27 |
公开(公告)号: | CN108802272B | 公开(公告)日: | 2021-03-02 |
发明(设计)人: | 王秀花;赵鑫;杨勇;常翔宇;努尔买买提;庄红莹;邓旭衡;刘思川 | 申请(专利权)人: | 伊犁川宁生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N31/16 | 分类号: | G01N31/16 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 835000 新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 头孢菌素 发酵 还原 测定 方法 | ||
1.一种头孢菌素发酵液中还原糖的测定方法,其特征在于:步骤如下:
(1)取头孢菌素发酵液,过滤,离心,得上清,采用菲林试剂测定,得到还原糖数值测定值X1;所述菲林试剂包括CuSO4溶液、酒石酸钾钠和氢氧化钠混合液和30%碘化钾溶液;所述测定的方法是:取上清每0.5ml,加入10ml菲林试剂中,摇匀后100℃条件下水浴加热10分钟;取出,迅速冷却,加入HCl溶液5ml,立即用Na2S2O3滴定液滴定至淡黄色时,加入1ml0.5%淀粉指示液,使溶液显蓝色,继续用Na2S2O3滴定至蓝色消失为终点;还原糖数值测定值X1的计算方法是:
X1=C×(V01—V样1)×6
上式中:
C:Na2S2O3滴定液实际浓度,mol/L;
V样1:样品消耗Na2S2O3滴定液的体积,ml;
V01:空白消耗Na2S2O3滴定液的体积,ml;
(2)计算影响值,影响值X2=0.4335×头孢菌素效价+0.0181;其中,根据高效液相法检测头孢菌素效价,头孢菌素效价的单位是万u/ml;
(3)(X1-X2)的值即为头孢菌素发酵液中还原糖的实际值。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,过滤是采用中速滤纸过滤,离心的转速是500r/min,时间是1min。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
CuSO4溶液按照如下方法制备:称取CuSO4·5H2O 62.5g,用水溶解并稀释至1000ml,摇匀,即得;
酒石酸钾钠和氢氧化钠混合液按照如下方法制备:称取188g酒石酸钾钠和125g氢氧化钠,用水溶解并稀释至1000ml,摇匀,即得;所述酒石酸钾钠为C4H4KNaO6·4H2O;
30%碘化钾溶液按照如下方法制备:称取150g碘化钾,用水溶解并稀释至500ml,摇匀,即得。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述HCl溶液的浓度为6mol/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述Na2S2O3浓度为0.1mol/L。
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