[发明专利]一种医用的免疫细胞培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种医用的免疫细胞培养基，属于生物治疗和细胞生物的技术和材料领域。

背景技术

在生物医学工程关于细胞的科研领域及医学临床应用中，主要目的是研究细胞的功能和作用。恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病，“手术、放疗与化疗”三大常规疗法仍不能解决肿瘤的复发与转移，实践证实，肿瘤生物免疫治疗可以很好地控制肿瘤的转移与复发，以常规治疗( 手术、放疗、化疗) 辅以肿瘤免疫治疗的综合疗法，将成为21 世纪人类征服癌症的主要工具。

体细胞技术是目前国际上最前沿的治疗技术，从人体外周血中分离出单核细胞，通过GMP 实验室进行扩增、诱导和活化培养，形成多种免疫杀伤细胞，然后回输到病人体内。这种免疫细胞具有显著识别和杀伤患者体内各种肿瘤细胞和病毒的活性，可增强人体免疫功能，提高对肿瘤细胞的杀伤能力，更好地控制肿瘤的转移与复发。支持这种治疗的关键耗材是培养血液单个核细胞( 主要是淋巴细胞) 用的无血清细胞培养基。早期的细胞培养液的添加物均用动物血清。但动物血清成分复杂存在因个体、产地和批号的不同，使血清批间质量差异甚大，直接影响基因工程等下游产品的分离、纯化等诸多不利因素。传统的无血清细胞培养基个性化比较强，一种无血清细胞培养基只能适应于某种或某类细胞的培养，目前，尚无适应大多数细胞的无血清细胞培养基产品。

浒苔富含碳水化合物、蛋白质、粗纤维、氨基酸、脂肪酸、维生素和多种矿物质, 其中铁含量在中国食物营养成分表上记载为我国食物之最，同时还含有脂肪和维生素。在浒苔蛋白质中，氨基酸种类齐全，必需氨基酸含量较高，其中缘管浒苔的限制氨基酸为赖氨酸，氨基酸评分为79；条浒苔的限制氨基酸为蛋氨酸，氨基酸评分为80。浒苔的脂肪酸组成中，多不饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的含量为分别为50.5%、12.7%和36.8%，其中包括近4%的奇数碳原子脂肪酸。因此浒苔是高蛋白、高膳食纤维、低脂肪、低能量，且富含矿物质和维生素的天然理想营养食品的原料。

发明内容

现有的免疫细胞无血清培养基，为了满足细胞生长，需要提供大量的营养元素，包括氨基酸类组分、维生素类组分、无机盐组分等等，中国专利CN 102604891 A公开了一种免疫细胞培养基，包括了上百种营养元素，配置起来非常复杂。

本发明所要解决的技术问题是：提供一种含有浒苔提取液的免疫细胞培养基,在现有培养基的基础上，加入浒苔提取液。

浒苔提取液的制备方法如下：

1）浒苔的预处理：新鲜浒苔洗净，烘干，研碎得浒苔粉。

2）浒苔提取液：取上述的浒苔粉，加入浒苔粉质量5-9倍的水，加热到40-60℃，然后用均质机均质，均质完后，加热到90-100℃，保持30-50min；降温到30℃，加入复合酶200-300U/g；升温到35-45℃，保持50-80min，

复合酶选自纤维素酶、溶菌酶、蛋白酶中的一种或几种。

3）提取液过滤，取滤液备用。

本发明所述的培养基，加入浒苔提取液的重量是5-10g/L。

具体的，本发明提供一种含有浒苔提取液的医用免疫细胞培养基，其特征在于，包括氨基酸类组分、维生素类组分、无机盐组分和浒苔提取液。

氨基酸类组分包括下列成分：

甘氨酸5-11mg/L、L- 精氨酸80-100mg/L、L- 门冬酰胺20-30mg/L、L- 谷氨酸10-15mg/L、L- 组氨酸20-30mg/L、L- 羟脯氨酸10-15mg/L、L- 亮氨酸25-55mg/L、L- 苯丙氨酸15-20mg/L、L- 色氨酸25-60mg/L、L- 缬氨酸40-45mg/L。

维生素类组分包括下列成分：

维生素H 0.01-0.02mg/L、氯化胆碱2-3mg/L、叶酸2-6mg/L、烟酰胺1-3mg/L、维生素B6 1-3mg/L、维生素B12 0.01-0.02mg/L、i- 肌醇3-8mg/L。

无机盐组分包括下列成分：

四水二硝酸钙0.01-0.06g/L、无水硫酸镁0.01-0.1g/L、碳酸氢钠3-5g/L、氯化钾0.08-1g/L、氯化钠3-8g/L。

浒苔提取液的重量是5-10g/L。

本发明首次发现，浒苔提取液可以促进细胞生长，浒苔提取液中含有的多种生物活性成分，可以极大促进细胞的生长发育。