[发明专利]一种用枯草芽孢杆菌工程菌降解1，2，3-三氯丙烷的方法

权利要求书

1.一种用于构建1，2，3-三氯丙烷降解工程菌的基因组合，其特征在于，包括卤烷脱卤酶基因、卤醇脱卤酶基因、环氧化物水解酶基因，核酸序列分别如SEQ ID NO.1、3、5所示。

2.一种降解1，2，3-三氯丙烷的枯草芽孢杆菌工程菌，其特征在于，由如下方法构建得到：首先合成权利要求1所述卤烷脱卤酶基因、卤醇脱卤酶基因和环氧化物水解酶基因，然后通过基因异位整合及抗性基因敲除的方法，将上述基因整合至枯草芽孢杆菌基因组中，获得可以分泌表达卤烷脱卤酶、卤醇脱卤酶和环氧化物水解酶的枯草芽孢杆菌工程菌；

具体地，构建方法包括如下步骤：

(1)基因合成：合成卤烷脱卤酶基因dhaA31、卤醇脱卤酶基因hheC和环氧化物水解酶基因echA；

(2)利用Pgrac启动子和PhoD信号肽序列，分别构建包含dhaA31基因、hheC基因和echA基因的枯草芽孢杆菌整合载体；

(3)将步骤(2)的整合载体转化枯草芽孢杆菌，通过基因异位整合及抗性基因敲除的方法，将dhaA31基因、hheC基因和echA基因依次整合至枯草芽孢杆菌基因组，构建得到可以分泌表达卤烷脱卤酶、卤醇脱卤酶和环氧化物水解酶的枯草芽孢杆菌工程菌。

3.权利要求2所述的枯草芽孢杆菌工程菌在降解1，2，3-三氯丙烷、2，3-二氯-1-丙醇和/或环氧氯丙烷方面的应用。

4.权利要求2所述的枯草芽孢杆菌工程菌在制备1，2，3-三氯丙烷、2，3-二氯-1-丙醇和/或环氧氯丙烷的降解制剂方面的应用。

5.一种用枯草芽孢杆菌工程菌降解1，2，3-三氯丙烷的方法，其特征在于，利用权利要求2所述的枯草芽孢杆菌工程菌降解1，2，3-三氯丙烷。