[发明专利]一种果蔬中2,4‑二氯苯氧乙酸残留检测方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全监测领域，具体涉及一种果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸残留检测方法。

背景技术

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)按照我国农药毒性分级标准，属低毒农药，在我国部分蔬菜和粮食上已经获得登记。2,4-D对植物有很强的生物活性,是一类高效、内吸、具高度选择性的除草剂和植物生长调节剂。在高浓度时,2,4-D是广谱除草剂,被广泛用于水稻、玉米、小麦等禾本科作物、草坪、牧场中的阔叶杂草；低浓度时,2,4-D作为植物生长调节剂可以促进作物生长,提高座果率，增大果实等，此外，2,4-D作为食品添加剂，还是应用广泛的水果防腐保鲜剂,主要用于增强果实抗病力、延缓果实衰老、延长水果贮藏期等。2,4-D在自然界中难以降解，导致2,4-D易于淋溶迁移进入水体和土壤，进而在生物体内积累，对人类健康和自然生态环境都有较大危害。作为除草剂和保鲜剂使用,2,4-D会在作物和果疏中产生残留,对人畜有一定的毒副作用。一些国家和国际组织在粮食作物、果疏、饮用水和环境标准中对2,4-D农药的残留上限作了严格规定。因此,开发2,4-D残留的快速检测具有重要意义。

目前，2,4-D检测方法有衍生气相色谱法(GC)、衍生气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)等。由于它含有强极性基团羧基，前两种方法直接检测时色谱峰拖尾，分析灵敏度低，为了提高弱酸的挥发性，需要在检测前将其衍生化为酯。衍生化的引入使操作变得繁琐，且耗费时间较长。液相色谱分析不需要衍生化，但前处理提纯要求严格，操作繁琐，不适宜大量样本的现场检测分析。

表面增强拉曼散射(SERS)效应是指在特殊制备的一些纳米金属表面或溶胶中,在激发区域内,导致纳米金属表面或附近吸附分子的拉曼散射信号大大增强的现象。作为一种分子光谱指痕鉴定方法，与高效液相色谱法相比，SERS具有检测速度快、操作简便、样品处理简单、便于携带等优点，是一种高灵敏度、高分辨率和方便快捷的检测技术。本发明采用SERS方法检测2，4-D农药残留，简单、快速、便携、准确，适用于在食品安全现场实时、快速的筛查方法，为食品安全监测提高技术保障。

发明内容

本发明提供了一种果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸残留表面增强拉曼光谱快速检测方法。本发明的技术方案如下：

步骤一：纳米金溶胶的制备：采用柠檬酸三钠还原氯金酸的方法制备纳米金溶胶，将氯金酸水溶液加热至沸腾，迅速加入柠檬酸三钠溶液，继续搅拌加热，至颜色至酒红色得到合适粒径的纳米金溶胶；

步骤二：标准溶液的配置：用甲醇水溶液将2,4-二氯苯氧乙酸分别配置系列浓度梯度为20，15，10，5，2,1μg/mL，取上述溶液分别与步骤一中的金溶胶按1∶5的比例混合，进行拉曼光谱检测，得到各浓度梯度溶液的表面增强拉曼光谱图；根据2,4-二氯苯氧乙酸的定性特征峰进行定性；以浓度为横坐标，2,4-二氯苯氧乙酸的特征峰的峰高为纵坐标，制作对应的标准曲线用以定量分析；

步骤三：仪器条件的设置：便携式拉曼光谱仪检测参数设定为785nm激光波长，200-300mW激光功率，扫描波长为400-1800cm^-1，积分时间5-15s；

步骤四：实际样品的表面增强拉曼光谱检测：

取10.0g蔬菜或水果匀浆经过提取，离心，净化浓缩，定容至2mL，采用步骤三中的步骤，得到表面增强拉曼光谱图；根据对应的定性特征峰，判定实际样品中是否含有2,4-二氯苯氧乙酸；根据步骤二得到的标准曲线，确定果疏中2,4-二氯苯氧乙酸的含量。

根据上述一种果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸残留检测方法，所述步骤一中浓度为0.01％-0.5％氯金酸的体积为50mL，1％柠檬酸三钠溶液的加入量为0.5-5.0mL；加热温度为100-160℃；加热时间为5-60min。

根据上述一种果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸残留检测方法，所述步骤二中标准溶液的配置包括：称取2,4-二氯苯氧乙酸粉末0.0200g，用甲醇水溶液溶解定容至100mL，制得200μg/mL储备液，利用甲醇水溶液将200μg/mL上述储备液稀释至20μg/mL、15μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、2μg/mL、1μg/mL的标准系列浓度，绘制标准曲线。