[发明专利]瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1、其制备方法及用途

说明书

本发明公开了一种瓜蒌皮寡/多糖GLP‑1‑1，其单糖组成包括阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖组成，三种单糖的摩尔比为：(0.1～1.0):(4～6):(8～12)。本发明还公开了其制备方法及用途，所述瓜蒌皮寡/多糖GLP‑1‑1具有血管紧张素转化酶抑制作用，可以用于制备血管紧张素转化酶抑制剂。

技术领域

本发明涉及中草药多糖的提取；具体涉及一种瓜蒌皮寡/多糖、其制备方法及用途。

背景技术

瓜蒌皮(Trichosanthis pericarpium)为葫芦科栝楼属植物栝楼(Trichosantheskirilowii Maxim.)或双边栝楼(TrichosanthesrosthoriniiHarms)的干燥成熟果皮。瓜蒌皮注射液为上药集团旗下子公司上海第一生化药业有限公司独家产品，是以瓜蒌皮为原料，经水提醇沉，再经过离子交换树脂洗脱而制成的灭菌水溶液，临床上用于冠心病，稳定型心绞痛的治疗，具有行气除满，开胸除痹之功效。瓜蒌皮注射液临床应用广泛，但物质基础尚不明确。目前对瓜蒌皮的化学成分研究也主要集中在小分子上，如从瓜蒌皮中分离出脂肪酸、甾醇、黄酮、氨基酸、核苷酸和生物碱成分，但瓜蒌皮聚糖类成分却鲜有报道。

肾素-血管紧张素系统(RAS)和激肽释放酶-激肽系统(KKS)对机体血压、电解质和体液平衡的维持都起着重要的作用。在RAS-KKS系统中血管紧张素转化酶(ACE)起着至关重要的作用，ACE能催化血管紧张素I(angiotensinI,AngI)转变为强效升高血压作用的物质血管紧张素II(angiotensinII,AngII)，与此同时，还将具有降压作用物质舒缓激肽(bradykinin)降解，使之失去降压作用，从而参与血压调节，大规模临床试验数据显示，血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)类药物能显著降低冠心病患者的死亡率和再发主要心血管事件的风险。

发明内容

根据现有技术中存在的上述问题，本发明将瓜蒌皮按照瓜蒌皮注射液国家药品标准进行提取，并以抗ACE活性跟踪为前提，对透析截留后的袋内大分子部分进行活性跟踪分离纯化和结构分析，为阐明瓜蒌皮注射液的化学物质基础提供依据。

本发明提供了一种瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1，其单糖组成包括阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖组成，三种单糖的摩尔比为：(0.1～1.0):(4～6):(8～12)；优选的，三种单糖的摩尔比为：0.2:4.3:10.00。

所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1，其相对平均分子量为800～10000Da；优选为800～4500Da，进一步优选为1367Da。

本发明还提供了所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其包括如下步骤：

(1)取瓜蒌皮，加水煎煮，收集滤液，减压浓缩后加入乙醇，静置后取上清液，滤过，干燥得浸膏；

(2)浸膏经透析后收集袋内部分，干燥后得到样品GLP；

(3)样品GLP过阴离子交换树脂，用水、0.1M、0.2M、0.5M和1.0M NaCl依次洗脱，其中0.1M洗脱组分得GLP-1；

(4)将洗脱组分GLP-1以0.2M NaCl为流动相，经分子筛凝胶柱层析，得瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1。

其中，

步骤(1)所述乙醇的质量分数优选为80～95％，更优选为90％；加入乙醇后，滤液中的含醇量优选为60～75％，更优选为70％；

步骤(2)所述透析优选使用截留分子量1000Da的透析袋透析；

步骤(3)所述阴离子交换树脂为DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂；

步骤(4)所述分子筛凝胶柱层析为Superdex 75分子筛凝胶柱层析；

步骤(1)和步骤(2)中的干燥为冷冻干燥。