[发明专利]瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1、其制备方法及用途有效
| 申请号： | 201710160906.3 | 申请日： | 2017-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN108623698B | 公开（公告）日： | 2021-12-07 |
| 发明（设计）人： | 王辉俊;叶冠;吴若铭;柯樱 | 申请（专利权）人： | 上海医药集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00;A61P9/10 |
| 代理公司： | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人： | 刘锋;郑丹 |
| 地址： | 201203 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 瓜蒌 多糖 glp 制备 方法 用途 | ||
1.一种瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1，其特征在于，其单糖组成包括阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖组成，三种单糖的摩尔比为：(0.1～1.0):(4～6):(8～12)，
其相对平均分子量为800～10000Da，以及
所述瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1由包括以下步骤的方法制备得到：
(1)取瓜蒌皮，加水煎煮，收集滤液，减压浓缩后加入乙醇，静置后取上清液，滤过，干燥得浸膏；
(2)浸膏经透析后收集袋内部分，干燥后得到样品GLP；
(3)样品GLP过阴离子交换树脂，用水、0.1M、0.2M、0.5M和1.0M NaCl依次洗脱，其中0.1M洗脱组分得GLP-1；
(4)将GLP-1以0.2M NaCl为流动相，经分子筛凝胶柱层析，得瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1。
2.如权利要求1所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1，其特征在于，其单糖组成包括阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖组成，三种单糖的摩尔比为：0.2:4.3:10.00。
3.如权利要求1所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1，其特征在于，其相对平均分子量为1367Da。
4.权利要求1～3中任一项所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)取瓜蒌皮，加水煎煮，收集滤液，减压浓缩后加入乙醇，静置后取上清液，滤过，干燥得浸膏；
(2)浸膏经透析后收集袋内部分，干燥后得到样品GLP；
(3)样品GLP过阴离子交换树脂，用水、0.1M、0.2M、0.5M和1.0M NaCl依次洗脱，其中0.1M洗脱组分得GLP-1；
(4)将GLP-1以0.2M NaCl为流动相，经分子筛凝胶柱层析，得瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1。
5.如权利要求4所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述乙醇的质量分数为80～95％，加入乙醇后，滤液中的含醇量为60～75％。
6.如权利要求4所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述透析是使用截留分子量1000Da的透析袋透析。
7.如权利要求4所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其特征在于：
步骤(3)所述阴离子交换树脂为DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂；
步骤(4)所述分子筛凝胶柱层析为Superdex 75分子筛凝胶柱层析。
8.权利要求1～3中任一项所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)取瓜蒌皮，加水煎煮2～4次，每次1～4小时，收集合并每次的滤液，减压浓缩至相对密度为1.10～1.25，加入质量分数为80～95％乙醇使滤液中的含醇量为60～75％，静置24～72小时，取上清液，滤过，干燥得浸膏；
(2)浸膏经截留分子量1000Da的透析袋透析后收集袋内部分，冷冻干燥后得到样品GLP；
(3)样品GLP过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂，用水、0.1M、0.2M、0.5M和1.0M NaCl洗脱，用苯酚硫酸跟踪，分别对应得到洗脱组分GLP-W、GLP-1、GLP-2、GLP-5和GLP-10；
(4)将0.1M NaCl洗脱得到的洗脱组分GLP-1以0.2M NaCl为流动相经Superdex 75分子筛凝胶柱层析，得瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1。
9.权利要求1～3中任一项所述的瓜蒌皮寡/多糖GLP-1-1在制备血管紧张素转化酶抑制剂中的用途。
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