[发明专利]一株芽孢杆菌发酵提取物在防治植物病虫害中的应用

说明书

本发明公开了Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物在防治植物病害与甜菜夜蛾中的应用，属于微生物农药领域。所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13551。所述Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物经培养基摇床发酵，乙酸乙酯萃取，硅胶柱层析得到，对番茄灰霉病菌、棉花枯萎病菌与苹果腐烂病菌等植物病害具有较好的抑制活性，最小抑制浓度（MIC）分别为4、8与8μg/mL；此外，对甜菜夜蛾也具有较好的杀虫活性，0.4 mg/mL浓度，抑制取食率达86.1±2.2%。因此，Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物可用于制备防治植物病害与甜菜夜蛾的微生物农药，相比化学合成农药，不易产生抗药性且环境兼容性好，具有较好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物农药领域，具体的说是Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物在防治植物病害与甜菜夜蛾中的应用。

背景技术

苹果、番茄与棉花等是我国的主要经济作物，尤其胶东苹果享誉全国，给当地带来巨大经济效益。近年来，随着化学合成农药的大量使用，上述作物病害抗药性日益严重，造成直接经济损失达20-70%，随之也带来农残超标、环境污染甚至人畜中毒等问题。

甜菜夜蛾（Spodoptera exigua Hübner）属鳞翅目夜蛾科，是一种世界性分布、间歇性大发生的杂食性害虫，在我国南北方经济作物产区均有发生，尤其北方发生面积较大。近年来，甜菜夜蛾经常暴发成灾，在我国由次要害虫上升为主要害虫，给农业生产带来严重损失。与上述植物病害防治类似，当前甜菜夜蛾主要依靠化学合成农药防控，其长期使用已经导致一系列令人担忧的问题，如：害虫产生抗药性、生态平衡遭到破坏及农药残留危害人类健康等。

微生物农药作为一种“环境友好”的无公害绿色农药，能够有效克服化学合成农药的弊端，可持续性强，在植物病虫害防治中的作用日益明显。因此，从微生物中寻找并开发生物农药，已经成为发展植物病虫害绿色防治的重要方向。

发明内容

本发明的目的在于提供Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物在制备防治植物病害与甜菜夜蛾的微生物农药方面的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物在制备防治植物病害与甜菜夜蛾微生物农药中的应用。所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 13551。所述植物病害为番茄灰霉病菌、棉花枯萎病菌与苹果腐烂病菌中的一种或几种。

所述Bacillus horneckiae DSM23495发酵提取物的制备方法如下：Bacillus horneckiae DSM23495经培养基摇床或静置发酵10-30天，乙酸乙酯萃取，柱层析制备得到。所述培养基比例为：1%胰蛋白胨，0.5%酵母提取物，1% NaCl，蒸馏水，pH调至7.0。

所述乙酸乙酯萃取物进行柱层析分离，以石油醚-乙酸乙酯100:1至1:1梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比20:1梯度的洗脱组分I用于制备防治植物病害的微生物杀菌剂；收集石油醚-乙酸乙酯体积比2:1梯度的洗脱组分Ⅱ用于制备防治甜菜夜蛾的微生物杀虫剂。所述柱层析为硅胶柱层析、凝胶柱层析、大孔吸附树脂柱层析与反相柱层析中的一种或几种。