[发明专利]一株植物乳杆菌菌株及其青贮饲料发酵剂

说明书

本发明公开了一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株，其保藏号为CGMCC No.12849。该菌株为同型发酵乳酸菌，能够生成大量乳酸，迅速降低pH，耐酸，对金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、沙门菌、大肠杆菌和酵母菌均具有较强的抑菌活性，并且对黄曲霉毒素AFB1具有高效吸附作用，与其他菌株相比具有明显的优势。利用此菌株作为青贮饲料发酵剂可以显著提高青贮饲料的发酵品质，并且青贮开封后对饲料中黄曲霉毒素AFB1的产生存在抑制作用，可作为青贮饲料发酵剂应用于畜禽养殖中，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于微生物益生菌应用技术领域，涉及一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)及青贮饲料发酵剂。

背景技术

青贮是一个复杂的微生物发酵过程，有乳酸菌、好氧细菌、酵母菌、霉菌等多种微生物参与，其中乳酸菌被认为是青贮发酵的关键微生物。青贮饲料品质的好坏与它所含乳酸菌的种类、数量以及活性有很大的关系，但植物表面附着的乳酸菌数量往往较少，为调制高品质的青贮饲料，最可行有效的方法是添加优质乳酸菌，增加青贮饲料原料中初始乳酸菌数量，使之尽早进入乳酸发酵阶段，乳酸浓度增加，迅速降低pH，抑制有害微生物的生长，改善青贮饲料发酵品质。

而青贮的发酵品质不仅仅与乳酸菌的种类数量有关，与青贮技术、原料、青贮条件等都有着重要的关系。当青贮在制作、贮存或开窖取用处理不当的话，霉菌的侵袭和霉菌毒素的污染就极可能发生。特别是在青贮饲料开启后，由于氧气的进入，原来被抑制的霉菌等好氧微生物被激活，致使青贮霉变的发生，许多情形下，饲料尚未发生肉眼可觉察的霉变，却已不同程度的霉菌毒素积聚，因此，霉菌毒素的粘附及降解已成为青贮应用的研究热点之一。

乳酸菌是青贮发酵的主要微生物，有研究表明其在粘附、降解黄曲霉毒素方面发挥着重要作用，因此开发一种乳酸菌青贮饲料发酵剂，在提高青贮饲料发酵品质的同时，有效吸附霉菌毒素，成为青贮添加剂菌种筛选及研发亟待解决的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一株优良特性的植物乳杆菌及其在青贮饲料发酵剂。

本发明提供了一株植物乳杆菌，该菌株从内蒙古发酵成熟的青贮饲料中分离并经过初筛复筛得到，在MRS培养基上的菌落形态为菌落淡白色，圆形，湿润，液滴状，凸起，表面光滑，有光泽，边缘整齐，不透明。菌体杆状，单个或呈短链排列存在，革兰氏染色阳性菌株，无芽孢。初步鉴定为植物乳杆菌。

利用细菌通用引物对筛选出的菌株进行16s rDNA PCR扩增后鉴定，经NCBI序列比对结果相似性最高(100％)的是植物乳杆菌，故分子鉴定DBNZW02为植物乳杆菌。

将该菌株命名为植物乳杆菌DBNZW02(lactobacillus plantarum DBNZW02)，于2016年8月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCCNo.12849。

本发明还提供包含该植物乳杆菌的青贮饲料发酵剂。

在本发明一个实施方案中，所述青贮饲料发酵剂为菌粉，所述菌粉还含有冻干保护剂。

其中，所述的冻干保护剂含有20％的脱脂奶粉、5％的蔗糖、1％的维生素C和1％的谷氨酸钠。

其中，所述布氏乳杆菌的含量为1×10⁶CFU/g。

本发明还提供所述青贮饲料发酵剂的制备方法如下：将所述植物乳杆菌进行发酵培养得到发酵液，所得菌液经离心得到菌体后，按菌体：冻干保护剂溶液＝1:10(质量比)加入冻干保护剂溶液，充分混匀，将上述混匀后的菌液置于冷冻干燥机中进行冻干得到青贮饲料发酵剂。