[发明专利]与小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D紧密连锁的分子标记及应用

权利要求书

1.与小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D紧密连锁的分子标记，其特征在于，其为分子标记HRM4，核苷酸序列如SEQ ID No:1所示；分子标记HRM4与小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D之间的遗传距离为0.5cM，二者共定位于小麦4D染色体上标记MK7472和MK3367之间2.89cM区段内，小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D能显著增加小麦旗叶长，LOD值大于4，解释15.9％的表型变异。

2.用于荧光定量PCR扩增权利要求1所述分子标记的引物对，其特征在于，包括上游引物和下游引物，序列分别如SEQ ID No:2-3所示。

3.权利要求1所述分子标记在小麦育种中的应用。

4.权利要求2所述引物对在筛选或鉴定长旗叶小麦品种中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测小麦的基因组DNA；

2)以待测小麦的基因组DNA为模板，设计用于荧光定量PCR扩增所述分子标记的引物对，进行荧光定量PCR扩增；所述引物对包括上游引物和下游引物，序列分别如SEQ ID No:2-3所示；

3)分析PCR扩增产物，进行基因分型。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤2)中荧光定量PCR扩增反应体系：SsoFast EvaGreen超混合液5μL、上游引物和下游引物各300ng、模板DNA 100ng、DNase/RNase-free去离子水加至总量为10μL；

荧光定量PCR扩增程序：95℃预变性5min；94℃变性15s、55℃退火30s，共50个循环；熔解曲线范围为65～95℃，每0.2℃读一次数，时间为10s。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，步骤3)利用高分辨熔解曲线进行基因分型，含有小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D的小麦品种均出现与小麦H461相同的熔解曲线，而不含有小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D的小麦品种均出现与小麦H461明显不同的熔解曲线。

8.权利要求2所述引物对在鉴定小麦旗叶长QTL QFll.sicau-4D中的应用。

9.权利要求2所述引物对在小麦分子标记辅助育种中的应用。