[发明专利]一种羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法在审
申请号: | 201710134431.0 | 申请日: | 2017-03-08 |
公开(公告)号: | CN107383186A | 公开(公告)日: | 2017-11-24 |
发明(设计)人: | 郑祖凤;郑训艺 | 申请(专利权)人: | 江西中藻生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/14;C07K1/34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丙基 聚糖 甲酸 钠双水相 萃取 分离 蛋白 方法 | ||
1.一种羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)制备藻蓝蛋白粗提取液:用去离子水清洗新鲜的螺旋藻2-4次,洗涤干净的螺旋藻,经高压细胞匀浆机,破碎时间为5-6min,超声波处理时间为12-14min,将破碎的螺旋藻悬浊液于离心机中,离心时间为10-15min,离心收集上清液,制得含藻蓝蛋白的粗提液于4-5℃下储存;
(2)双水相萃取:向步骤(1)所得螺旋藻破壁的粗提液中加入羟丙基葡聚糖和甲酸钠,震荡混合时间为1-2h,静置分相,藻蓝蛋白富集于上相;
(3)采用膜孔径为3-5um的滤膜对藻蓝蛋白粗提液进行粗过滤,处理时间为20-25小时,再于-10--12℃冷冻干燥10-12小时,制得双水相萃取藻蓝蛋白。
2.根据权利要求1所述羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述的压力为150-350kg/cm2。
3.根据权利要求1所述羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于:在步骤(1)中,所述离心速率为800-1000r/min。
4.根据权利要求1所述羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于:在步骤(2)中,所述羟丙基葡聚糖:甲酸钠:破壁的粗提液的重量比为0.25-0.6:0.35-0.5:1。
5.根据权利要求1所述羟丙基葡聚糖和甲酸钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于:在步骤(3)中,所述滤膜的流速为150mL/min,渗透通量为55-65L/(h·m2)。
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