[发明专利]一种生物组织基质材料、制备方法及其用途

权利要求书

1.一种生物组织基质材料，其特征在于，包括细胞外基质，所述细胞外基质包括胶原纤维、生长因子和纤连蛋白；

所述生物组织基质材料通过包括以下步骤的方法制备：

（1）原料的初处理：取小肠粘膜下层组织材料，清洗，滤干；

（2）病毒灭活：采用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡小肠粘膜下层组织材料，进行病毒灭活；

（3）在超声环境下清洗由步骤（2）得到的小肠粘膜下层组织材料，然后滤干；

（4）脱细胞：脱细胞液包括胰蛋白酶和PBS溶液，所述脱细胞液还包括EDTA、EDTA-2Na或EDTA-4Na；在多频超声环境中用脱细胞液处理步骤（3）得到的小肠粘膜下层组织材料，进行脱细胞；

（5）在超声环境中将步骤（4）获得的脱细胞小肠粘膜下层组织材料进行清洗，得到脱细胞小肠粘膜下层基质材料。

2.根据权利要求1所述的生物组织基质材料，其特征在于，所述的方法还包括以下步骤：

（6）固定成型：将一层或多层由步骤（5）得到的小肠粘膜下层基质材料放置在模具上；

（7）真空冷冻干燥：在真空冷冻干燥机中进行小肠粘膜下层基质材料的冷冻干燥。

3.根据权利要求1或2所述的生物组织基质材料，其特征在于，所述的细胞外基质由哺乳动物的小肠粘膜下层组织材料制成。

4.根据权利要求1或2所述的生物组织基质材料，其特征在于，所述的细胞外基质由猪或牛的小肠粘膜下层组织材料制成。

5.根据权利要求1或2所述的生物组织基质材料，其特征在于，所述的细胞外基质中的动物源DNA残留量小于10ng/mg，α-Gal抗原清除率不低于99%。

6.根据权利要求1或2所述的生物组织基质材料，其特征在于，所述的细胞外基质中的动物源DNA残留量小于3ng/mg，α-Gal抗原清除率不低于99%。

7.一种生物组织基质材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）原料的初处理：取小肠粘膜下层组织材料，清洗，滤干；

（2）病毒灭活：采用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡小肠粘膜下层组织材料，进行病毒灭活；

（3）在超声环境下清洗由步骤（2）得到的小肠粘膜下层组织材料，然后滤干；

（4）脱细胞：脱细胞液包括胰蛋白酶和PBS溶液，所述脱细胞液还包括EDTA、EDTA-2Na或EDTA-4Na；在多频超声环境中用脱细胞液处理步骤（3）得到的小肠粘膜下层组织材料，进行脱细胞；

（5）在超声环境中将步骤（4）获得的脱细胞小肠粘膜下层组织材料进行清洗，得到脱细胞小肠粘膜下层基质材料。

8.根据权利要求7所述的生物组织基质材料的制备方法，其特征在于，

步骤（2）中的过氧乙酸-乙醇溶液，其中过氧乙酸的体积百分比浓度为0.1%-5%、乙醇的体积百分比浓度为5%-40%，过氧乙酸-乙醇溶液与小肠粘膜下层组织材料的体积比为(5-20)︰1，灭活时间2-4小时，温度范围为10-40℃；

所述步骤（4）脱细胞液中胰蛋白酶的质量百分比浓度为0.01-0.2%，EDTA、EDTA-2Na或EDTA-4Na的浓度为0.1-1mmol/L，脱细胞液的pH值为7.0-8.0；所述脱细胞液与小肠粘膜下层组织材料体积比为(20-40)︰1，脱细胞过程在双频超声波装置中进行，其中低频频率范围为20-40KHz，低频处理5-40min；高频频率为60-90KHz，高频处理5-40min，脱细胞液的温度范围为20-35℃；超声功率5000W以上。

9.根据权利要求7或8所述的生物组织基质材料的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）的脱细胞液中胰蛋白酶的质量百分比浓度为0.02-0.05%，EDTA、EDTA-2Na或EDTA-4Na的浓度为0.4-0.8mmol/L；脱细胞液的pH值为7.2-7.5。

10.根据权利要求7或8所述的生物组织基质材料的制备方法，其特征在于，所述的制备方法还包括以下步骤：

（6）固定成型：将一层或多层由步骤（5）得到的小肠粘膜下层基质材料放置在模具上；

（7）真空冷冻干燥：在真空冷冻干燥机中进行小肠粘膜下层基质材料的冷冻干燥。