[发明专利]一种六堡茶提取物中茶多糖的检测方法在审
申请号: | 201710110720.7 | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN107014761A | 公开(公告)日: | 2017-08-04 |
发明(设计)人: | 冯嘉倩 | 申请(专利权)人: | 梧州市雅正农业科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/38 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙)44295 | 代理人: | 龚元元 |
地址: | 543000 广西壮族自治区*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 六堡茶 提取物 多糖 检测 方法 | ||
1.一种六堡茶提取物中茶多糖的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:配制葡萄糖标准溶液作为对照;
步骤2:将六堡茶提取物样品配制成检测液;
步骤3:用紫外分光光度法测定标准对照品溶液和检测液的吸光度,绘制标准曲线;
步骤4:计算六堡茶提取物样品中茶多糖含量。
2.根据权利要求1的六堡茶提取物中茶多糖的检测方法,其特征在于,步骤1中的配制葡萄糖标准溶液的具体步骤为:取D-无水葡萄糖对照品,加水溶解并稀释制成每1ml中含0.3mg的溶液,作为对照品溶液。
3.根据权利要求1的六堡茶提取物中茶多糖的检测方法,其特征在于,所述的步骤2中的将六堡茶提取物样品配制成检测液,包括以下步骤:
步骤S1:取六堡茶3g,置250ml烧瓶中,分别加入30ml沸水浸提3次,每次10min,合并滤液;
步骤S2:加乙醇调整至乙醇含量80%,过滤,用浓度为80%乙醇洗涤滤渣3次,30ml/次,挥干溶剂,滤纸连同滤渣一起置烧瓶中,加50ml水,加热回流0.5h,趁热过滤,用65-100℃热水洗涤,合并滤液,定容至100ml;
步骤S3:精密吸取5ml提取溶液,加入盐酸溶液,混合液中盐酸的浓度为0.5mol/L,在40℃下水解30min,冷却后调pH至中性;
步骤S4:将酸水解后的多糖提取液置规格为15cm×2cm的聚酰胺层析柱中,用70-90℃热水洗脱,收集滤液,定容至100ml,作为供试品溶液。
4.根据权利要求1的六堡茶提取物中茶多糖的检测方法,其特征在于,步骤3中所述的紫外分光光度法测定为:将葡萄糖标准溶液和检测液分别加入5%的苯酚溶液1.0ml,振摇混匀,加5.0ml硫酸,用微型漩涡混合仪迅速振摇混匀,室温下放置30分钟,以第1管为空白,在487nm波长处测定吸光度。
5.根据权利要求1的六堡茶提取物中茶多糖的检测方法,其特征在于,步骤3所述的标准曲线的绘制,包括以下步骤:
步骤SS1:分别精密吸取对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml分别置10ml具塞试管中,分别加二纯水至1.0ml,各精密加入5%的苯酚溶液1.0ml,振摇混匀;
步骤SS2:加5.0ml硫酸,用微型漩涡混合仪迅速振摇混匀,室温下放置30分钟;
步骤SS3:以第1管为空白,在487nm波长处测定吸光度,以吸光度和质量作标准曲线。
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