[发明专利]一种分离噬菌体用载体及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201710101279.6 申请日: 2017-02-24
公开(公告)号: CN106811457B 公开(公告)日: 2019-05-03
发明(设计)人: 林茂;付汉清 申请(专利权)人: 集美大学
主分类号: C12N11/14 分类号: C12N11/14;C12N7/00;C12R1/63
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 王加贵
地址: 361000 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 分离 噬菌体 载体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种分离噬菌体用载体,包括陶瓷类载体和负载在所述陶瓷类载体上的副溶血性弧菌。

2.一种分离噬菌体用载体的制备方法,包括以下步骤:

1)将副溶血性弧菌接种于宿主菌培养基中培养,得到宿主菌培养液;

2)将陶瓷类载体浸没于所述步骤1)得到的宿主菌培养液中,将浸泡后的陶瓷类载体干燥至含水率为45~55%,得到分离噬菌体用载体。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)得到的宿主菌培养液中副溶血性弧菌的含量为108~1012cfu/ml。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)得到的陶瓷类载体上副溶血性弧菌的含菌量为1010~1016cfu/g。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述陶瓷类载体的孔隙率大于92%,所述陶瓷类载体的最大比表面积为350~450m2/m3

6.根据权利要求2或5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中浸泡时,载体的质量与宿主菌培养液的体积比为(0.5~1.5)g∶(0.5~1.5)ml。

7.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中培养的条件包括:所述培养的温度为28~35℃,所述培养的转速为150~200rpm,所述培养的时间为14~24h。

8.权利要求1所述分离噬菌体用载体或权利要求2~7任意一项所述方法制备得到的载体在分离水体中噬菌体的应用,包括:将权利要求1所述分离噬菌体用载体或权利要求2~7任意一项所述方法制备得到的分离噬菌体用载体放入水体中3~7h,分离得到噬菌体。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述分离噬菌体用载体放入水体中的深度≤0.5~1.5m。

10.根据权利要求8或9所述的应用,其特征在于,所述分离包括:

将载体取回后再次放入宿主菌培养液中,得到噬菌体富集液;

将所述宿主菌培养液涂布于LB或NB平板上,再将所述噬菌体富集液滴于所述平板上,培养14~24h,得出分离结果。

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