[发明专利]基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法

权利要求书

1.一种基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是以金纳米团簇探针为发光体，以过硫酸根离子为共反应剂，将金纳米团簇探针修饰在玻碳电极上，并将其作为工作电极进行电化学发光测试，利用谷胱甘肽对金纳米团簇探针-过硫酸根离子的电致化学发光体系发光强度的抑制作用，从而表现出电致化学发光强度的变化，能直接用于谷胱甘肽的含量测定；

所述的金纳米团簇探针为功能化金纳米团簇材料；所述功能化修饰金纳米团簇材料为N-乙酰化-L-半胱氨酸-金纳米团簇或牛血清白蛋白-金纳米团簇；所述的N-乙酰-L-半胱氨酸-金纳米团簇的水溶液由下述方法制备获得：往4 mL浓度为0.08 mol/L的N-乙酰-L-半胱氨酸溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mol/L的氢氧化钠与0.4 mL浓度为20 mg/mL氯金酸溶液，混匀后置于37 ℃恒温水槽中孵育3小时，反应结束后的反应液用截留分子为3500的透析袋进行透析纯化处理，得到N-乙酰-L-半胱氨酸-金纳米团簇水溶液；金纳米团簇探针修饰玻碳电极由下述方法制备的：将直径3 mm的玻碳电极用1.0 μm、0.3 μm，0.05 μm的Al₂O₃粉末依次抛光，打磨，至光滑镜面，再依次放入HNO₃溶液，无水乙醇，去离子水中超声清洗3分钟，N₂吹干；取5 μL N-乙酰-L-半胱氨酸保护的金纳米团簇的水溶液滴加在处理好的玻碳电极表面，室温干燥，得N-乙酰-L-半胱氨酸-金纳米团簇修饰玻碳电极，将N-乙酰-L-半胱氨酸-金纳米团簇修饰玻碳电极浸泡在0.1 mol/L硼氢化钠溶液中反应5分钟~1小时，得到金纳米团簇探针修饰玻碳电极。

2.根据权利要求1所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是以金纳米团簇材料修饰玻碳电极为工作电极，铂丝电极为对电极，Ag/AgCl为参比电极，将上述电极插入0.1 mol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中，施加-0.2 V ~ -2 V电压，进行恒电位还原，得到金纳米团簇探针修饰玻碳电极。

3.根据权利要求1所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是将金纳米团簇材料修饰玻碳电极浸泡在0.1 mol/L硼氢化钠溶液中反应5分钟~1小时，得到金纳米团簇探针修饰玻碳电极。

4.根据权利要求1或2或3所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是以金纳米团簇探针修饰玻碳电极为工作电极，以过硫酸根离子为共反应剂，采用阶跃脉冲法进行电化学发光测试，初始电位为0 V，脉冲时间为10 s，终止电位为-2 V，脉冲时间为1 s。

5.根据权利要求4所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是采用三电极体系进行测试，以金纳米团簇探针修饰玻碳电极为工作电极，铂丝电极为对电极，Ag/AgCl为参比电极，缓冲溶液为磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲溶液，所用电解质为KCl或KNO₃。

6.根据权利要求5所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是缓冲溶液pH值为7.4，过硫酸根浓度为0.1 mol/L。

7.根据权利要求6所述的基于金纳米团簇探针的谷胱甘肽电致化学发光测定方法，其特征是将金纳米团簇探针修饰玻碳电极，铂丝电极，Ag/AgCl电极插入含有不同浓度谷胱甘肽的过硫酸根离子共反应剂缓冲溶液中，采用阶跃脉冲法进行电化学发光测试，初始电位为0 V，脉冲时间为10 s，终止电位为-2 V，脉冲时间为1 s；电致化学发光强度值与谷胱甘肽浓度的对数值在1.0×10^-9 mol/L~1.0×10^-5 mol/L和1.0×10^-5 mol/L~1.0×10^-1 mol/L的范围内呈良好的线性关系，检测限为3.2×10^-10 mol/L。