[发明专利]一种舌癌细胞的核酸适配体及试剂盒在审
申请号: | 201710048325.0 | 申请日: | 2017-01-20 |
公开(公告)号: | CN106636106A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | 俞永标 | 申请(专利权)人: | 中山标佳生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;G01N33/574;G01N33/569;A61K47/26;A61P35/00 |
代理公司: | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人: | 陈书华 |
地址: | 528451 广东省中山市南朗镇*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 舌癌 细胞 核酸 适配体 试剂盒 | ||
1.一种能特异性结合人舌癌细胞的核酸适配体,其特征在于序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种舌癌的诊断试剂盒,其包含权利要求1所述的核酸适配体。
3.如权利要求1所述的核酸适配体在制备用于检测舌癌细胞的试剂中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其中检测舌癌细胞的试剂为用于舌癌组织切片中舌癌细胞成像的试剂。
5.如权利要求3-4任一项所述的应用,所述舌癌细胞为TCA-8113细胞。
6.如权利要求1所述的核酸适配体在制备治疗靶向舌癌的药物中的应用,所述适配体作为抗肿瘤药物的载体使用。
7.如权利要求1所述的核酸适配体在制备舌癌的肿瘤标志物中的应用。
8.一种鉴定权利要求1所述的特异性结合人舌癌细胞的核酸适配体的方法,包括如下步骤:
(1)合成以下序列所示的随机单链DNA文库和引物:
随机文库:5’
-TCAGTGATCGAATGGACCAC(40N)CTGCTTGCCTCATCCGTCCA-3’;
上游引物:5’-FAM-TCAGTGATCGAATGGACCAC-3’;
下游引物:5’-Biotin-TGGACGGATGAGGCAAGCAG-3’;(2)SELEX筛选特异核酸适体文库:
(3)PCR扩增文库;
(4)DNA单链文库的制备;
(5)反向筛选:以鼻咽癌细胞5-8F为对照,进行反向筛选;
(6)正向筛选;
(7)多轮筛选:将步骤6得到的DNA单链文库替代步骤4中的DNA单链文库,重复上述步骤5-6的操作;最终可得到富集度高的序列,即为可用于检测人舌癌细胞TCA-8113的核酸适配体。
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