[发明专利]一种利用抑菌培养基培育茉莉花的组培方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种利用抑菌培养基培育茉莉花的组培方法，属生物技术领域。

背景技术

茉莉花系木樨科素馨属植物，学名为Jasminum sambac(Linn.)Aiton，原产于印度、波斯湾等地区。我国的茉莉花种植面积约占世界种植面积的三分之二，鲜花产量居世界首位。由于茉莉花不仅是装饰、观赏的佳品，还具有很高的经济价值。除可供窨制花茶外，还可提取芳香油作为香料，茉莉花香的主要成分是茉莉酮，香质纯正优雅，风味殊胜，故为我国香料工业调制茉莉型香精的主要原料，又是茉莉花茶的花源。用茉莉花窨制的花茶，香气清雅、鲜灵而芬芳，茶汤醇厚、浓郁而不浊，在国内外享有盛名。用茉莉花提取的茉莉油，又是贵重的日用化工原料。还可制作洗眼药，医治结膜炎等。

茉莉花传统是以扦插繁殖，繁殖方法简便。但是，对于一些优良单株或濒危品种，由于母株有限，可供扦插的枝条很少，难于在短时间内达到大量繁殖的目的。通过茉莉花组织培养，一方面可以不受季节影响，在短时间内达到大量繁殖的目的，从而实现规模化繁殖；另一方面，可以在保存其原有的优良性状的基础上，实现茉莉花的种质资源保存、提纯复壮和转基因研究等。

茉莉花组织培养的成本主要包括组培苗生产所需的培养基、设施设备、供电成本、耗材和人工成本。常规的茉莉花组织培养方法要求外植体接种在高温高压灭菌后的无菌培养基中才能正常生长，耗能大，人工操作成本高。如果能通过药物抑菌的方法来改造培养基，使培养基无需经过高温高压灭菌，就能够获得茉莉花的正常生长。然而，针对不同的植物品种难以筛选到一种合适的抗菌剂，往往是当培养基抗菌时，植物组织的生长就受到抑制；而植物组织正常生长，就无法获得满意的抗菌效果。其原因，一是还没有一种抗生素对所有的菌类都有效，而且抗生素药效期短；二是有些抗菌素、防腐剂在有效的浓度下，其杀菌、抗菌离子对植物组织直接产生伤害，有些则产生盐害。必须选择与植物组织亲和、药效期长(至少一个生长周期)，不产生盐害并具有杀菌、抗菌活性的物质作为抗菌剂。因此，筛选合适的抗菌药剂是抑菌组培技术得以应用的关键。

本发明就是为茉莉花组织培养提供一种抑菌培养方法。一方面可以降低茉莉花组织培养对设施设备的要求，尤其不需要高温高压灭菌所需配置的高压锅设备，缩减了投资成本，电能消耗大幅度降低；另一方面，采用这种培养基开展茉莉花组织培养，组培环节大为简化，人工操作的速度大幅提高，从而降低了人工成本。此外，由于改造后的培养基自身具有杀菌、抗菌或抑菌作用，能有效控制组织培养过程中的污染问题，又不会对茉莉花生长产生毒害或抑制，即不影响茉莉花的正常生长，从根本上简化了茉莉花组织培养。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用抑菌培养基培育茉莉花的组培方法。

本发明的目的是通过以下方法实现的。

本发明的一种利用抑菌培养基培育茉莉花的组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、无菌水制备、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：

1.培养容器消毒：将培养瓶、瓶盖及接种用的塑料盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L环丝氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸钠的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；

2.培养基配制：诱导培养基为MS+1～3mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+10～50mg/L丙酸钙+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；增殖培养基为：MS+1～2mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+10～50mg/L丙酸钙+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为1/2MS+1～3mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+10～50mg/L丙酸钙+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；所述MS，为1962年，Murashige和Skoog公开的MS培养基；所述6-BA，指6-苄氨基嘌呤；所述IBA，指α-吲哚丁酸；配制培养基时，先称各培养基配方中的蔗糖和琼脂粉，加培养基总重量1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固后备用；