[发明专利]同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：包括WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的专用检测引物WSSV-F和WSSV-R、AHPND-F和AHPND-R、EHP-F和EHP-R、IHHNV-F和IHHNV-R、阳性对照品、阴性对照品、DNA聚合酶、10×PCR缓冲液、Mg²⁺、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸、三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸和无菌超纯水；WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的专用检测引物WSSV-F和WSSV-R、AHPND-F和AHPND-R、EHP-F和EHP-R、IHHNV-F和IHHNV-R，引物序列如下：

对虾白斑综合征病毒WSSV

上游引物：WSSV-F：TTCTCACCTCATGCTTTCTTCC SEQ ID NO:1

下游引物：WSSV-R：TACTTGCTTAGAGATGGCTTCG SEQ ID NO:2

对虾急性肝胰腺坏死症AHPND

上游引物：AHPND-F：GGAAGTCGGTCGTAGTGTAG SEQ ID NO:3

下游引物：AHPND-R：ATATCGCATAACCAAGCCATTC SEQ ID NO:4

虾肝肠胞虫EHP

上游引物：EHP-F：GAGAGTAGCGGAACGGATAG SEQ ID NO:5

下游引物：EHP-R：GCATCACGGACCTGTTATTG SEQ ID NO:6

传染性皮下及造血组织坏死病毒IHHNV

上游引物：IHHNV-F：AAGAGCAGCGACAGTTCAG SEQ ID NO:7

下游引物：IHHNV-R：CGGCTTCCTTAGTTGATAGTTG SEQ ID NO:8；

阳性对照品为SEQ ID NO:9，SEQ ID NO:10，SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12的核酸序列混合作为模板；

阴性对照为：不含有对虾白斑综合征病毒、对虾急性肝胰腺坏死症(pir^VP)、虾肝肠胞虫、传染性皮下及造血组织坏死病毒任一病原的任意DNA核酸序列。

2.一种同时检测对虾WSSV、AHPND、EHP、IHHNV的多重PCR引物，其特征在于：引物序列如下：

对虾白斑综合征病毒WSSV

上游引物：WSSV-F：TTCTCACCTCATGCTTTCTTCC SEQ ID NO:1

下游引物：WSSV-R：TACTTGCTTAGAGATGGCTTCG SEQ ID NO:2

对虾急性肝胰腺坏死症AHPND

上游引物：AHPND-F：GGAAGTCGGTCGTAGTGTAG SEQ ID NO:3

下游引物：AHPND-R：ATATCGCATAACCAAGCCATTC SEQ ID NO:4

虾肝肠胞虫EHP

上游引物：EHP-F：GAGAGTAGCGGAACGGATAG SEQ ID NO:5

下游引物：EHP-R：GCATCACGGACCTGTTATTG SEQ ID NO:6

传染性皮下及造血组织坏死病毒IHHNV

上游引物：IHHNV-F：AAGAGCAGCGACAGTTCAG SEQ ID NO:7

下游引物：IHHNV-R：CGGCTTCCTTAGTTGATAGTTG SEQ ID NO:8。