[发明专利]采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法

说明书

本发明公开了一种采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其过程包括：(1)将水提取后的丹参药渣干燥，粉碎，用乙醇提取浓缩后得到丹参醇提物浸膏；(2)将浸膏分别经石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯部位、浓缩；(3)采用中压制备液相得到总丹参酮粗提物；(4)采用UPLC分析，然后合并丹参酮IIA和二氢丹参酮I部位(5)经高压制备液相分离得到丹参酮IIA和二氢丹参酮I单体化合物。本发明为首次采用中、高压制备液相联用技术，可高效快速地从丹参药渣中制备分离纯化高纯度的丹参酮IIA和二氢丹参酮I化合物，充分利用废弃资源，具有重要的环境保护意义和经济价值。

技术领域

本发明属于中药植物化学领域，具体涉及到一种采用高压制备液相提取纯化丹参酮IIA和二氢丹参酮I单体化合物的制备方法。

背景技术

丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)属唇形科植物，主产于河北、安徽、江苏、四川等地，始载于《神农本草经》，能够起到活血通络、凉血消痈、祛瘀止痛、清心除烦等作用。丹参的化学成分分为脂溶性和水溶性两部分，丹参酮(tanshinone,Tsn)是丹参中脂溶性松香烷型二萜类化合物，又称为总丹参酮，具有广泛的药理作用，受到医药学家的高度关注。脂溶性的丹参酮类化合物具有广泛的药理作用和临床应用。其化学结构特征是具备邻醌或对醌结构，且能够被还原为二酚类衍生物，氧化后又转化为醌，在此过程中起到传递电子的作用；且其体内代谢产物也能够影响机体的多种反应，因此具有抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量及抗菌、抗炎、神经保护等临床药理作用。

丹参类注射液在生产过程多采用传统的水提醇沉工艺，该制备工艺使得丹参中的脂溶性丹参酮类成分不能被提取而残留于固体药渣中，造成资源的浪费。随着世界人口老龄化的趋势，心血管疾病患者发病率上升，丹参药材的年消耗量呈逐年增长趋势。2012年，我国丹参类注射液市场规模达到近157亿元，2013年全年近190亿元，占据整个中药注射液市场35％以上的份额。然而，丹参类注射液制备生产过程中产生大量的丹参固体废弃物，导致丹参资源性物质利用效率低下，同时造成中药资源的严重浪费和环境污染。因此，丹参药渣中资源性物质的高效利用已成为必然的发展趋势。

丹参酮类成分具有抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量及抗菌、抗氧化、抗炎等多种生物活性和应用价值，尤其是在抗肿瘤活性方面尤为突出。丹参酮IIA具有改善冠状动脉血循环、血管内皮细胞修复、抗动脉粥样硬化(AS)形成、抗心肌肥厚以及防治糖尿病并发症等作用；二氢丹参酮Ⅰ具有显著抑制乙酰胆碱酯酶作用、通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和分化来发挥抗肿瘤作用以及显著的抗菌活性等。

目前纯化丹参酮类化合物的方法主要有醇提水沉、大孔树脂纯化、CO₂超临界萃取、氯仿萃取等，采用中低压制备色谱方法分离提纯丹参脂溶性成分，可大大地缩短分离时间，在不影响分离度的前提下，却可以分离得到更大量的化合物，极大地提高了分离制备效率。

本发明涉及丹参酮类单体化合物，包含丹参酮IIA和二氢丹参酮I，其化学结构式如下：

随着人们对丹参酮ⅡA、二氢丹参酮Ⅰ和隐丹参酮等丹参酮类化合物的生物活性及开发应用研究的深入，对上述丹参酮类单体化合物的纯化制备具有重大科学意义和应用价值。

发明内容

发明目的：本发明的目的是充分利用丹参注射液提取后的药渣，提供一种采用高压制备液相提取纯化丹参酮IIA和二氢丹参酮I单体化合物的制备方法。

技术方案：为了达到以上技术效果，本发明的技术方案如下：

一种采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，包括以下步骤：

步骤A：提取：将丹参药渣粉碎后过筛得到丹参药渣粉末，加入乙醇溶液，进行回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液并浓缩得到丹参醇提物浸膏；