[发明专利]采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法

权利要求书

1.一种采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤A：提取：将丹参药渣粉碎后过筛得到丹参药渣粉末，加入乙醇溶液，进行回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液并浓缩得到丹参醇提物浸膏；

步骤B：萃取除杂：取步骤A制备得到的丹参醇提物浸膏，加纯水溶解，分别用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，反复萃取三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液；

步骤C：中压制备液相纯化：称取步骤B制备得到的乙酸乙酯部位浓缩液加入硅胶搅拌均匀，然后装入中压进样器中，选择石油醚和乙酸乙酯为流动相，设置流动相流速为15～20mL/min，进行中压制备液相纯化；

步骤D：采用UPLC分析步骤C的中压制备液相洗脱物，然后合并丹参酮IIA和二氢丹参酮I部位：

步骤E：高压制备液相纯化：取步骤D合并的丹参酮IIA和二氢丹参酮I部位，浓缩，加入甲醇溶解，用0.22μm滤膜过滤后进高压制备液相纯化，选择甲醇和超纯水为流动相，梯度洗脱，经高压制备液相纯化得丹参酮IIA和二氢丹参酮I；

步骤C，中压制备液相中梯度洗脱程序为：流动相为A相为石油醚-B相为乙酸乙酯，梯度洗脱：0～5min，95％A；5～12.4min，95％～28％A；12.4～15.3min，A0％；

步骤D中的UPLC的色谱条件为ACQU-ITY UPLC^RBEH C₁₈色谱柱；柱温30℃；流速0.4mL/min；进样量2μL，流动相:A相为乙腈，B相为0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱：0～1min，70％A，1～6min，70％～80％A，6～10min，100％A；

步骤E高压制备液相的液相条件：WatersXbridge OBD C₁₈色谱柱，19mm×150mm，5μm，流动相为A相为甲醇-B相为水，梯度洗脱：0～5min，75％A；5～15min，75％～80％A；15～35min，90％A；35～45min，100％A，检测波长285nm；柱温为室温；流速15mL/min；进样量500μL；质谱条件：ESI离子源，扫描方式为正离子模式；锥孔电压：50V，毛细管电压：3kV，母离子碰撞能量：4V，碎片离子碰撞能量：20-50V；离子源温度：105℃，脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：700L/h，锥孔气流量：50L/h；质量扫描范围：350-600Da，扫描时间：0.3s。

2.根据权利要求1所述的采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其特征在于，步骤A加入8-12倍量70-90％体积浓度的乙醇。

3.根据权利要求1所述的采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其特征在于，步骤A加入8倍量90％体积浓度的乙醇，进行回流提取2次，每次2小时。

4.根据权利要求1所述的采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其特征在于，

步骤A所述的丹参药渣为丹参类注射液在生产过程中，采用水提提取后的药渣。