[发明专利]一种环状转座子复合物及其应用有效
| 申请号： | 201710013203.8 | 申请日： | 2017-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN106801044B | 公开（公告）日： | 2021-03-23 |
| 发明（设计）人： | 耿亮;祝珍;辛文 | 申请（专利权）人： | 北京全式金生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人： | 张文祎;赵晓丹 |
| 地址： | 100192 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 环状 座子 复合物 及其 应用 | ||
1.一种环状转座子复合物，其特征在于：所述环状转座子复合物包含Tn5转座酶和插入DNA；所述插入DNA包含转座子末端序列、2个标签序列和含酶切位点的DNA序列；其中，所述插入DNA两端为转座子末端序列，在转座子末端序列内侧则是2个标签序列；所述2个标签序列之间为含酶切位点的DNA序列，所述环状转座子复合物有且仅有一个插入DNA。
2.根据权利要求1所述的环状转座子复合物，其特征在于：所述含酶切位点的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列、含限制性酶切位点的DNA序列或含有不互补碱基对的双链DNA序列。
3.权利要求1-2任一所述环状转座子复合物在构建DNA文库中的应用。
4.一种DNA文库的构建方法，其特征在于，该方法包括：获取靶DNA；制备环状转座子复合物：所述环状转座子复合物包含Tn5转座酶和插入DNA；将靶DNA与环状转座子复合物孵育，酶解反应；即得DNA文库；
所述插入DNA包含转座子末端序列、2个标签序列和含酶切位点的DNA序列；其中，所述插入DNA两端为转座子末端序列，在转座子末端序列内侧则是2个标签序列；所述2个标签序列之间为含酶切位点的DNA序列，所述环状转座子复合物有且仅有一个插入DNA。
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于：所述含酶切位点的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列、含限制性酶切位点的DNA序列或含有不互补碱基对的双链DNA序列。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于：当所述2个标签序列之间的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列，加入UDG酶进行酶解反应；
当所述2个标签序列之间为含限制性酶切位点的DNA序列，加入限制性内切酶进行酶解反应；
当所述2个标签序列之间为含有不互补碱基对的双链DNA序列，加入核酸外切酶进行酶解反应。
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