[发明专利]提高基因编辑效率的方法和系统有效
申请号: | 201680088506.X | 申请日: | 2016-11-03 |
公开(公告)号: | CN109689693B | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 王健;胡莹莹;罗舟 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N5/10;C12N15/52;C12N15/63 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 王正君;徐迅 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 基因 编辑 效率 方法 系统 | ||
1.一种融合蛋白,其特征在于,所述的融合蛋白具有式Ia或Ib所述结构:
E-P (Ia)
P-E (Ib)
其中,
E为核酸内切酶蛋白元件;
P为PEST蛋白元件;
“-”表示连接上述各元件的肽键或肽接头,
所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.一种分离的多核苷酸,所述的多核苷酸编码权利要求1所述的融合蛋白。
3.一种载体,所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.一种基因工程细胞,其特征在于,所述基因工程细胞含有权利要求3所述的载体,或含有权利要求2所述的多核苷酸,或含有权利要求1所述的融合蛋白,所述基因工程细胞不包含植物细胞。
5.如权利要求4所述的基因工程细胞,其特征在于,所述基因工程细胞为动物细胞或微生物细胞。
6.一种基因编辑系统,其特征在于,所述基因编辑系统包括权利要求1所述的融合蛋白、或权利要求2所述的多核苷酸、或权利要求3的载体。
7.如权利要求6所述的基因编辑系统,其特征在于,所述基因编辑系统选自下组:CRISPR/Cas基因编辑系统、CRISPR/Cpf1基因编辑系统、CRISPR/C2c2基因编辑系统、Argonaute/gDNA基因编辑系统、锌指核酸酶基因编辑系统 (ZFNs)、和类转录激活因子核酸酶基因编辑系统(TALENs)。
8.一种核酸内切酶介导的基因编辑方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
使用权利要求1所述的融合蛋白对靶基因进行编辑。
9.一种提高核酸内切酶介导的基因编辑系统的基因编辑效率的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
在靶细胞中,表达PEST蛋白和核酸内切酶的权利要求1所述的融合蛋白。
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