[发明专利]PCR试剂的稳定化及测定

说明书

本发明涉及PCR或RT‑PCR反应混合物的一种或多种组分在环境温度下的稳定化。具体而言，提供了用于使PCR或RT‑PCR反应混合物的一种或多种组分在环境温度下基本稳定储存的制剂、组合物、制品、试剂盒和方法。

交叉引用

本申请要求2015年12月8日提交的美国临时申请号62/264,758的权益，该临时申请通过引用以其全文并入本文。

背景技术

需要以下改进的制剂和方法，其使得PCR或RT-PCR反应混合物的一种或多种组分在环境温度下稳定一段时间，该时间足以储存和运输PCR或RT-PCR反应混合物的所述一种或多种组分以供研究、诊断和治疗目的。

发明内容

在一些实施方案中，本文描述了用于使PCR或RT-PCR反应混合物的一种或多种组分在环境温度下基本稳定储存的制剂，其包含：(i)羟基酸；和(ii)硼酸盐组合物，其中PCR或RT-PCR反应混合物的所述一种或多种组分在环境温度下储存后保持稳定至少三个月的时间。在一些实施方案中，所述羟基酸选自式(I)化合物：(I)，其中R1选自H、未取代或取代的烷基和未取代或取代的芳基。在一些实施方案中，所述羟基酸选自乳酸、苹果酸、丙二酸、酒石酸、柠檬酸及其组合。在一些实施方案中，所述羟基酸是乳酸。在一些实施方案中，所述羟基酸不是苹果酸、丙二酸、酒石酸或柠檬酸。在一些实施方案中，所述羟基酸不是苹果酸。在一些实施方案中，所述羟基酸不是丙二酸。在一些实施方案中，所述羟基酸不是酒石酸。在一些实施方案中，所述羟基酸不是柠檬酸。在一些实施方案中，所述硼酸盐组合物选自硼酸、硼酸盐、四硼酸钠、硼砂及其组合。在一些实施方案中，所述硼酸盐组合物选自硼酸、四硼酸钠及其组合。在一些实施方案中，所述制剂包含乳酸和硼酸。在一些实施方案中，所述制剂包含乳酸、硼酸和四硼酸钠。在一些实施方案中，所述制剂选自表2的制剂。

在一些实施方案中，本文描述了用于使PCR或RT-PCR反应混合物的一种或多种组分在环境温度下基本稳定储存的制剂，其包含：(i)非还原糖；和(ii)缓冲液，其中PCR或RT-PCR反应混合物的所述一种或多种组分在环境温度下储存后保持稳定至少三个月。在一些实施方案中，所述非还原糖选自蔗糖和海藻糖。在一些实施方案中，所述非还原糖是蔗糖。在一些实施方案中，所述缓冲液选自Tris-HCl、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、磺基水杨酸、磺基间苯二甲酸、草酸、硼酸盐、CAPS(3-(环己基氨基)-1-丙磺酸)、CAPSO(3-(环己基氨基)-2-羟基-1-丙磺酸)、EPPS(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪丙磺酸)、HEPES(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙磺酸)、MES(2-(N-吗啉基)乙磺酸)、MOPS(3-(N-吗啉基)丙磺酸)、MOPSO(3-吗啉基-2-羟基丙磺酸)、PIPES(1,4-哌嗪二乙磺酸)、TAPS(N-[三(羟甲基)甲基]-3-氨基丙磺酸)、TAPSO(2-羟基-3-[三(羟甲基)甲基氨基]-1-丙磺酸)、TES(N-[三(羟甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸)、bicine(N,N-二(2-羟乙基)甘氨酸)、tricine(N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸)、tris(三(羟甲基)氨基甲烷)以及bis-tris(2-[二(2-羟乙基)氨基]-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇)。在一些实施方案中，所述制剂包含Tris-HCl。在一些实施方案中，所述制剂包含蔗糖和Tris-HCl。在一些实施方案中，所述制剂选自表3的制剂12或13。