[发明专利]免疫原性得到增强的疫苗抗原

说明书

本发明通过向动物施用融合蛋白或用编码该融合蛋白的基因转化了的转化体而提高抗原肽的免疫原性，所述融合蛋白包含抗原肽和佐剂蛋白质，所述佐剂蛋白质包含选自志贺毒素2e的B亚基(Stx2eB)、大肠杆菌不耐热毒素的B亚基(LTB)及霍乱毒素的B亚基(CTB)中的2个以上的蛋白质。

技术领域

本发明涉及作为疫苗而言有用的融合蛋白、包含对该融合蛋白进行编码的DNA的DNA构建物、包含该DNA构建物的载体及转化体。

背景技术

作为防治病害的有效的方法有疫苗的利用，然而有时会有所得的预防效果不充分的情况。对此可以考虑如下的情况等各种理由，即，作为疫苗设计的抗原的免疫原性本来就很弱的情况、由新生儿或老年人那样接种疫苗的个体侧的免疫力引起的情况。已知作为大肠杆菌性腹泻症的原因毒素的ST是由18个氨基酸(STp(猪型))或19个氨基酸(STh(人型))构成的分子量约2000的小分子，自古以来免疫原性极低。以ST作为低免疫原性分子模型，进行了用于提高免疫原性的研究。

Klipstein等人(1985)(非专利文献1)通过制作将STh化学地与LTB融合了的抗原，封入明胶胶囊并进行经口施用，而确认了血清IgG和小肠IgA的抗体效价升高，为了实用化需要进一步的免疫原性的提高。

Clements(1990)(非专利文献2)通过在大肠杆菌中表达LTB-ST融合蛋白，对其进行纯化并向小鼠进行腹腔内注射，而在血清中确认了抗ST抗体的诱导，然而需要进一步的免疫原性的升高。

Zhang等人(2010)(非专利文献3)通过在大肠杆菌中表达在LT全毒素上融合了ST的蛋白质，对其进行纯化，与弗氏的不完全佐剂一起向兔子进行肌肉注射，而确认了抗体诱导和对ST毒素的中和活性的诱导，由于是包含佐剂的注射施用，因此抗原的进一步的免疫提高很重要。

Rosales-Mendoza等人(2011)(非专利文献4)通过在烟草中表达LTB与STh的融合蛋白，并向小鼠进行经口施用，而确认了抗LT抗体效价的升高，然而对于抗ST抗体效价并没有提及。

另一方面，本发明人等在日本专利5360727(专利文献1)中报告，利用具有特定的氨基酸序列的接头(PG12)，使植物中高产大肠杆菌不耐热毒素B亚基(LTB)、志贺毒素2e的B亚基(Stx2eB)，然而对于该融合蛋白的作为疫苗的性能、融合有第三抗原时的该抗原的性能并不清楚。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利5360727号说明书

非专利文献

非专利文献1：Klipstein等人，Infection and Immunity(1985)50:328-32

非专利文献2：Clements，Infection and Immunity(1990)58:1159-66

非专利文献3：Zhang等人，Clinical and Vaccine Immunology(2010)17:1223-31

非专利文献4：Rosales-Mendoza等人，Plant Cel Rep(2011)30:1145-52

发明内容

发明所要解决的问题

本发明的课题在于，提供一种免疫原性得到增强的疫苗抗原。

用于解决问题的方法