[发明专利]细胞判定方法、细胞判定装置及细胞判定程序

说明书

本发明涉及一种细胞判定方法，所述细胞判定方法根据细胞内的糖原的含量判定细胞种类，并且具备：取得步骤，测定细胞的光路长度，取得光路长度数据；计算步骤，根据得到的光路长度数据，计算出与细胞的光路长度相关的光路长度指标；比较步骤，将计算出的光路长度指标与阈值进行比较；和判定步骤，根据比较的结果，判定细胞是细胞内的糖原含量多的细胞种类或者是细胞内的糖原含量少的细胞种类。

技术领域

本发明涉及细胞判定方法、细胞判定装置及细胞判定程序。

背景技术

来自人的胚胎干细胞(ES细胞)及诱导多能干细胞(iPS细胞)等干细胞具有分化成多种细胞的能力(多能性)，期待在药物开发领域、医疗领域中的应用。进行从干细胞分化诱导成目标细胞时的分化效率大大依赖于作为起始材料的干细胞的状态。即，如果干细胞维持多能性、没有保持未分化的状态，则分化诱导的效率降低。因此，为了将这些干细胞进行产业应用，管理干细胞的品质极为重要，需要监控干细胞，非侵入性地判定状态。

已知ES细胞在未分化状态下厌氧地使用糖酵解系统而产生三磷酸腺苷(ATP)。另外，如果进行分化，则主要成为通过利用了柠檬酸循环(TCA循环)的氧化磷酸化的ATP供给(非专利文献1)。已知ES细胞与分化后的细胞相比葡萄糖需求性更高，而且细胞质含有糖原(非专利文献2)。

作为糖原的检测方法，已知有古典组织化学染色(PAS染色：Periodic acidSchiff stain，系氏高碘酸染色)(例如，非专利文献2)。另外，在非专利文献3中，报道有通过拉曼分光成像，对ES细胞的细胞质中的糖原进行定量。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Cell Stem Cell，2013年，第12卷，pp.127-137.

非专利文献2：J.Anat.，2004年，第205卷，pp.247-255.

非专利文献3：Anal.Chem.，2011年，第83卷，pp.6254-6258.

发明内容

发明所要解决的课题

PAS染色法需要细胞的染色，因此，无法实现非侵入性的观察。在非专利文献3所记载的拉曼分光成像中，能够不对细胞进行染色而观察。然而，由于拉曼散射光的光强度极弱，所以观察所需要的照明光强度也强，有可能对细胞造成损伤。另外，在拉曼分光成像中，难以从来自培养基中的各种成分的拉曼散射光，将细胞特异性的拉曼散射光分光，无法直接观察培养基中的细胞。

本发明是鉴于这些问题而做出的，其目的在于提供能够根据细胞内的糖原的含量，非侵入且简便地判定细胞种类的细胞判定方法、细胞判定装置及细胞判定程序。

用于解决课题的技术手段

本发明提供一种细胞判定方法，其为根据细胞内的糖原的含量判定细胞种类的细胞判定方法，具备：取得步骤，测定细胞的光路长度，取得光路长度数据；计算步骤，根据得到的光路长度数据，计算出与细胞的光路长度相关的光路长度指标；比较步骤，将计算出的光路长度指标与阈值进行比较；和判定步骤，根据比较的结果，判定细胞为细胞内的糖原含量多的细胞种类或者是细胞内的糖原含量少的细胞种类。

本发明的细胞判定方法是基于细胞内的糖原含量越多则光路长度越长的关系的发现。在此，“光路长度”与“相位差”或“光学厚度”相同意思。

根据本发明的细胞判定方法，能够根据细胞内的糖原的含量，非侵入且简便地判定细胞种类。另外，由于以光路长度为指标，所以能够直接判定培养基中的细胞。

上述取得步骤也可以是由细胞的定量相位显微镜图像测定光路长度，取得光路长度数据的步骤。