[发明专利]CD137特异性的蛋白

说明书

本发明提供人脂质运载蛋白突变蛋白，其结合CD137并且可用于制药应用中，例如作为用于治疗或预防诸如癌症、感染性疾病和自身免疫性疾病的人疾病的抗癌剂和/或免疫调节剂。本发明还涉及制备本文所述的CD137结合脂质运载蛋白突变蛋白以及包含这种脂质运载蛋白突变蛋白的组合物的方法。本发明进一步涉及编码这种脂质运载蛋白突变蛋白的核酸分子和用于产生这种脂质运载蛋白突变蛋白和核酸分子的方法。此外，本发明公开了这些脂质运载蛋白突变蛋白以及包含一种或多种这种脂质运载蛋白突变蛋白的组合物的治疗性和/或诊断性用途。

背景技术

CD137是一种肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族分子，其活性可能参与许多免疫介导的自身免疫性和炎性疾病。CD137也是癌症免疫治疗的靶标。

已证明CD137信号传导对抗原免疫响应的维持和扩张，以及对记忆T细胞的产生是基本的。鼠和人T细胞的许多研究表明，CD137促进增强的细胞增殖、存活和细胞因子产生(Croft，2009，Nat Rev Immunol 9：271-285)。已有研究表明，一些CD137激动剂mAb增加共刺激分子表达，并显著增强溶细胞性T淋巴细胞响应，从而导致在各种模型中的抗肿瘤功效。已经证明了CD137激动剂mAb在预防和治疗方面的功效。此外，CD137单一疗法和联合疗法肿瘤模型已经建立了可持久的抗肿瘤保护性T细胞记忆响应(Lynch，2008，ImmunolRev.22：277-286)。在多种本领域公认的自身免疫模型中，CD137激动剂也已显示出抑制自身免疫反应(Vinay，2006，J Mol Med 84：726-736)。CD137的这种双重活性呈现了提供抗肿瘤活性同时抑制可能与破坏免疫耐受的免疫治疗方法相关的自身免疫性副作用的潜力。

因此，基于CD137在调节免疫响应中的作用，对结合人CD137、增加CD137介导的响应并由此为治疗或预防各种疾病和病症如癌症、感染性疾病和自身免疫性疾病提供潜在治疗的化合物存在长期未满足的需求。

因此，本发明的一个目的是提供这种化合物，其是源自脂质运载蛋白的突变蛋白。各种脂质运载蛋白的突变蛋白是一类快速扩张的治疗剂，并且通过高度复杂的人工工程可将各种脂质运载蛋白的突变蛋白构建为对与野生型脂质运载蛋白的天然配体不同的靶标显示出高亲和力和特异性(参见如，WO 99/16873、WO 00/75308、WO 03/029463、WO 03/029471和WO 05/19256)。

定义

以下所列定义了在本说明书中使用的术语、短语和缩写。本文列出和定义的所有术语旨在涵盖所有语法形式。

如本文所使用，除另有规定外，“CD137”是指人CD137。CD137也称为“4-1BB”或“肿瘤坏死因子受体超家族成员9(TNFRSF9)”或“淋巴细胞活化诱导的(ILA)”。人CD137是指由UniProt Q07011定义的全长蛋白，其片段或其变体。

如本文所使用，“可检测的亲和力”是指以通常至少约10^-5M或更低的亲和力常数结合选定靶标的能力。较低的亲和力通常不再能通过常规方法例如ELISA测量，因此是次要的。

如本文所使用，可以通过本领域技术人员已知的多种方法测量本发明的蛋白(如，脂质运载蛋白的突变蛋白)或其融合多肽与选定靶标(在本发明中为CD137)的“结合亲和力”(并由此可以测定突变蛋白-配体复合物的KD值)。这种方法包括但不限于，荧光滴定、竞争ELISA、如等温滴定量热法(ITC)的量热法和表面等离子体共振(BIAcore)。这样的方法在本领域中是公知的，并且其实例也在下文详述。

还注意到，相应结合剂与其配体之间的复合物的形成受多个不同因素的影响，如各自结合配偶体的浓度、竞争者的存在、所采用的缓冲系统的pH和离子强度以及用于测定解离常数K_D的实验方法(例如荧光滴定、竞争ELISA或表面等离子体共振，仅举几个例子)，或甚至用于评估实验数据的数学算法。