[发明专利]用于治疗遗传性眼病的方法和组合物

说明书

本公开提供将药剂递送至眼睛的靶向肽和含有编码靶向肽的序列的载体。本发明人已发现用于将药剂诸如病毒性载体靶向眼部细胞的肽。本公开描述了一种利用这些新型肽来例如指导病毒衣壳到感兴趣细胞类型的方法。在此情况下，眼部细胞(诸如视网膜细胞)被所鉴别的肽靶向。具有被修饰以包括此类肽的衣壳蛋白的载体可用于向眼睛提供治疗剂。

相关申请

本申请要求2015年2月20日提交的美国临时申请号62/118,934的优先权，所述临时申请的整个内容以引用方式并入本文。

介绍

基因转移现在被广泛认为是用于在细胞和分子水平下分析生物事件和疾病过程的强力工具。最近，基因疗法用于治疗遗传性(例如腺苷脱氨酶(ADA)缺陷)或获得性(例如癌症或感染性疾病)的人疾病的应用已受到相当多的注意。随着改进的基因转移技术的出现和不断发展的缺陷基因相关疾病文库的鉴别，基因疗法已从治疗理论快速进化到实际的现实。

传统上，基因疗法已被定义为其中外源基因被引入到患者细胞内以便校正先天性遗传误差的程序。尽管超过4500种人疾病目前被分类为遗传性的，但是已鉴别相对少的这些疾病在人基因组中的特异性突变。直到目前，这些罕见遗传性疾病表示基因疗法工作的排他性目标。因此，大部分NIH批准的基因疗法方案迄今为止已涉及将缺陷基因的功能拷贝引入到具有已知先天性遗传误差的个体的体细胞中。仅在最近，有研究者和临床医师开始了解，人癌症、某些形式的心血管疾病和许多缺陷型疾病也具有重要的遗传组分并且出于设计新型基因疗法的目的，应被认为“遗传性病症”。因此，基因疗法最近已广泛定义为通过将新基因信息引入到受影响生物体中来校正疾病表型。

在体内基因疗法中，转移基因被原位引入到接受者生物体的细胞中，即接受者内。体内基因疗法已在若干动物模型中评估。若干最新出版物已报道了指导基因原位转移到器官和组织诸如肌肉、造血干细胞、动脉壁、神经系统以及肺部中的可行性。还已经报道将DNA直接注射到骨骼肌、心肌中和将DNA-脂质复合物注射到脉管系统中在体内产生了可检测表达水平的插入的基因产物。

治疗眼睛遗传性疾病(例如，遗传性眼睛遗传疾病，诸如导致眼盲的疾病)仍是个问题。此类疾病的实例是色素性视网膜炎、黄斑病、利伯氏先天性黑朦(Leber'scongenital amaurosis)、利伯氏遗传性视神经病变、早发性严重视网膜营养不良、全色盲、视网膜劈裂症、眼白化病、眼皮肤白化病、青光眼、斯特格氏病(Stargardt disease)、无脉络膜、年龄相关性黄斑变性、脊髓小脑性共济失调7型(SCAT)、色盲以及影响角膜的溶酶体贮积病(诸如黏多糖病(MPS)IV和MPS VII)。因此，需要开发用于眼睛遗传性疾病的疗法。

概述

本发明人已发现用于将药剂诸如病毒性载体靶向眼部细胞的肽。本公开描述了一种利用这些新型肽来例如指导病毒衣壳到感兴趣细胞类型的方法。在此情况下，眼部细胞(诸如视网膜细胞)被所鉴别的肽靶向。具有被修饰来包括此类肽的衣壳蛋白的载体可用于向眼睛提供治疗剂。

如本文所用，术语“靶标”意指病毒诸如腺相关病毒(AAV)的衣壳蛋白相对于另一种类型的组织(例如脑组织)优选结合至一种类型的组织(例如视网膜细胞)。在某些实施方案中，遗传修饰的衣壳蛋白可以通过以高于相当的、未修饰的衣壳蛋白10％至1000％的水平结合来“靶向”眼部细胞。例如，具有遗传修饰的衣壳蛋白的AAV可以大于未修饰AAV病毒50％至100％的水平结合至眼部细胞。

本发明提供一种含有靶向肽的修饰的腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白，其中所述靶向肽的长度是3至10个氨基酸(即3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)并且其中所述靶向肽将AAV靶向至眼部细胞。在某些实施方案中，靶向肽的长度为3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸。

本发明提供一种含有遗传修饰以编码上文所述的肽的衣壳蛋白的AAV病毒。