[发明专利]一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用，所述方法包括磷酸铝溶液的制备、磷酸铝溶液的置换处理、磷酸铝溶液的重悬处理。采用本方法可以实现磷酸铝佐剂表面电荷和粒径趋于稳定且pH值更加接近于人体体液pH值，适用于一种或多种抗原的吸附，符合多种疫苗在制剂中的应用需求。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用。

背景技术

铝佐剂(aluminum-cotaining adjuvants)包括氢氧化铝佐剂(aluminiumhydroxide adjuvant)和磷酸铝佐剂(aluminium phosphate)两种。氢氧化铝佐剂等电点11.4，是大小为2-10nm的纤维状粒子，聚集后以松散的颗粒形式存在。化学结构上氢氧化铝以羟基形式存在，在pH7.4的溶液中，胶体结构以阳离子形式是阴离子抗原的良好吸附剂。磷酸铝佐剂不是组分单一的物质，而是羟基磷酸铝复合物，磷酸基团对羟基的置换程度取决于反应物和沉淀的条件及其等电点。商品磷酸铝佐剂的等电点是5.0，在pH7.4的溶液中呈阴离子形式存在，是阳离子抗原的良好吸附剂。

铝佐剂具有高度的生物安全性。Stanley等通过同位素标记法证明肌肉注射的铝佐剂在机体内可以被有效的溶解吸收并最终通过尿液排出。铝佐剂可通过多种机制增强抗原的免疫原性提高免疫应性。作用机制包括：可溶性抗原与佐剂结合成的颗粒形式有利于APCs吞噬；注射位点的沉积作用；诱导T细胞显著增殖，增强Th2型免疫应答；诱导单核细胞分化为成熟的CD细胞。因此，铝佐剂在疫苗制剂工艺中被广泛应用，特别是含有蛋白或多糖抗原的疫苗中。美国授权的含铝佐剂的儿童用疫苗包括：白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗(DTaP)，b型流感嗜血杆菌结合疫苗，肺炎结合疫苗，乙肝疫苗，人乳头瘤疫苗。

在生理条件下，磷酸铝佐剂适用于吸附阳离子抗原，被应用于多价肺炎结合疫苗中。磷酸铝佐剂的制备，一般方法是将可溶性铝盐溶液和磷酸盐溶液以一定的比例混合。根据混合的方法不同，具体常见包括连续反应法和批量反应法。配制磷酸铝佐剂需要可溶性铝盐溶液，磷酸盐溶液，以及合适的置换缓冲溶液体系。

铝佐剂在生产和使用过程中经历了两种环境：佐剂吸附抗原的疫苗环境；皮下或者肌肉注射后的组织间液环境。佐剂吸附抗原的疫苗环境，决定了抗原的吸附率；而吸附率会影响机体对抗原的免疫应答反应。

铝佐剂颗粒的大小是铝吸附制品质量评价的重要评价指标，并且可能影响到制品的免疫特性。在疫苗制剂中，典型的铝佐剂粒径大小＜10nm。因此，如何有效的控制磷酸铝佐剂的粒径大小是制剂工艺中的重要环节。

发明内容

本发明目的是提供一种磷酸铝佐剂及其制备方法与应用。

本发明技术方案如下：

一种磷酸铝佐剂的制备方法，包括以下步骤：

1)磷酸铝溶液的制备

将碱性可溶性磷酸盐溶液以及可溶性铝盐溶液以相同的恒定流速同时滴加到反应容器中，反应制得磷酸铝溶液，在反应过程中维持磷酸铝溶液的pH恒定在4.0-6.0；

或者，将碱性可溶性磷酸盐溶液以恒定的流速滴加到一定体积的可溶性铝盐溶液中，反应制得磷酸铝溶液，直到pH达到4.0-6.0；

其中，所述可溶性磷酸盐包括磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾中的一种或几种；

所述碱性可溶性磷酸盐溶液为由所述可溶性磷酸盐溶液和氢氧化钠溶液配制的具有一定酸碱缓冲能力的混合溶液，其中磷酸根离子的浓度为0.290-0.430mol/L；

所述可溶性铝盐包括硫酸铝钾，硝酸铝，氯化铝中的一种或几种；

2)磷酸铝溶液的置换处理