[发明专利]基于DNA折纸模板和纳米金棒构建Dolmen结构的方法

权利要求书

1.基于DNA折纸模板和纳米金棒构建Dolmen结构的方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：

(1.1)通过晶种生长法制备特定尺寸纳米金棒；

(1.2)制备特异性设计矩形DNA折纸；

(1.3)按照纳米金棒与DNA折纸按摩尔比为5:1的比例加入纳米金棒，在45℃～20℃条件下循环梯度退火，使特定尺寸纳米金棒与特异性设计矩形DNA折纸杂交，使得纳米金棒构建成Dolmen结构；

所述晶种生长法制备特定尺寸纳米金棒具体包括：

(2.1)将摩尔浓度为0.01mol/L～1mol/L的十六烷基三甲基溴化铵水溶液和摩尔浓度为1mmol/L～100mmol/L的氯金酸水溶液搅拌混匀，加入摩尔浓度为1mmol/L～100mmol/L的硼氢化钠水溶液；

(2.2)将步骤2.1获得的混合溶液置于20℃～40℃条件下，静置反应1～3h；

所述晶种生长法制备特定尺寸纳米金棒具体包括：

(3.1)将摩尔浓度为0.01mol/L～1mol/L的十六烷基三甲基溴化铵水溶液和摩尔浓度为1mmol/L～100mmol/L的氯金酸水溶液按体积比10:1～40:1混合，搅拌混匀；

(3.2)20～40℃条件下，边搅拌边向步骤3.1的溶液中加入摩尔浓度为1mM～100mM的硝酸银溶液和摩尔浓度为0.1mol/L～2mol/L的盐酸溶液，搅拌1～5min；

(3.3)20～40℃条件下，边搅拌边向步骤3.2的溶液中滴加摩尔浓度为10mmol/L～200mmol/L的抗坏血酸溶液，溶液从黄色迅速变为无色，搅拌1～5min；

(3.4)20～40℃条件下，边搅拌边向步骤3.3的溶液中滴加步骤2.1的稀释液，搅拌1～5min，静置反应10～20h；

(3.5)溶液从无色变成棕色，反应结束，采用离心提纯法浓缩步骤3.4获得的溶液，将离心产物分散到超纯水中；

所述纳米金棒为经ssDNA1所示核苷酸序列修饰后的纳米金棒，通过以下方法制备：

(4.1)根据步骤3.5中离心产物溶液与ssDNA1所示核苷酸序列按体积比为100:1～20:1混合，搅拌混匀，在20～40℃条件下震荡孵育2～10h；

(4.2)将步骤4.1溶液滴加氯化钠溶液，滴加3～5次，每次滴加不超过5μL，间隔时间0.5～1h，滴加完毕后在20～40℃条件下震荡孵育2～10h；

(4.3)采用离心提纯法浓缩步骤4.2获得的溶液，将离心产物常温保存；

所述特异性设计矩形DNA折纸通过以下方法制备：

(5.1)将摩尔浓度为1nmol/L～5nmol/L的M13mp18噬菌体环状单链DNA分子与摩尔浓度为10nmol/L～50nmol/L的订书钉单链按和设计捕获单链按体积比1:1:1～1:5:5混合，搅拌混匀；

(5.2)将步骤5.1的溶液在95℃～25℃条件下梯度退火，反应结束后，离心提纯；

取150μL纳米金棒溶液，制备ssDNA1修饰的纳米金棒：

1)将150μL纳米金棒溶液离心清洗2次，4500rpm离心10分钟，将离心产物分散到100μL超纯水中；

2)取5μL100μM的ssDNA1加入到步骤1)中的溶液，同时加入1.5μL质量分数为1％的十二烷基硫酸钠溶液，震荡混匀，置于温度为37℃、转速为250rpm的恒温摇匀仪，震荡孵育4h；

3)往步骤2)溶液中滴加2mol/L的氯化钠溶液，每次滴加2.5μL，间隔半小时，滴加4次，滴加完毕后，置于温度为37℃、转速为250rpm的恒温摇匀仪，震荡孵育8h；

4)步骤3)反应结束后，采用离心提纯法浓缩步骤3)获得的ssDNA1修饰的纳米金棒，离心提纯参数为4000rpm，10min，离心提纯三次，最终得到15μL的浓缩纳米金棒溶液，常温放置待用；

其中，与末端修饰捕获链的订书钉链互补的SH-DNA序列如下：

5’-TTTTTTTTTTTTTTT AGCGA-3’，(ssDNA1)。