[发明专利]一种血必净中间体多指标成分的含量测定方法

说明书

本发明涉及一种血必净中间体多指标成分的含量测定方法。精密度良好、重现性良好、稳定性良好，可以用来检测血必净注射液中间体中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、苯甲酸的含量，有助于提高产品质量，进而提升人民群众是生活质量。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种血必净中间体中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、苯甲酸含量的检测分析方法。

背景技术

血必净注射液为棕黄色至棕红色的澄明液体，主要成分为红花、川芎、丹参和当归等，功能主治为化瘀解毒，用于温热类疾病见发热、喘促、心悸、烦燥等瘀毒互结症。随着临床研究的不断深入，其应用范围也在不断拓宽，可用于肾脏、肺部、心血管、脓毒血症、弥漫性血管内凝血(DIC)、多器官功能障碍综合征(MDOS)、重症急性胰腺炎、糖尿病酮症酸中毒(DKA)等疾病。

血必净注射液包含红花、赤芍、川芎、当归、丹参五味中药材成分，由各药材饮片经适当的工艺加工，制成红花提取物、川丹当提取物、赤芍提取物，提取物经混合工序，制得血必净中间体，再配以其他辅料，经多步生产工序，最终制成血必净注射液。

血必净中间体作为制剂生产的中间环节，其质量监控一直是制剂生产的关键环节，而其中功效成分的监控既能表征工艺的稳定性，更是中间体质量优劣的直接反映。

血必净中间体包含三种功效成分——羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸，目前三种成分分别采用三种不同的液相色谱条件进行定性定量检测，功效成分含量测定无法同步进行，试剂、耗材费用消耗大、人工占用时间长、检测周期长。

本发明所建立的分析方法采用同一个液相色谱条件，通过相对校正因子的测定，以“一测多评”方法同时测定血必净中间体中所含羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、苯甲酸含量，经与原方法结果比对，准确度与精密度相当，但克服了原方法检测周期长、试剂耗材费用高等弊端，节约了试剂、耗材、人工成本，缩短了检测周期，能更为有效地控制产品质量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种快速、准确地测定血必净中间体多指标成分含量，且更加节省试剂耗材费用，节约人工成本的检测方法。

本发明所述的血必净中间体功效成分含量检测方法，包括以下步骤：

(1)以芍药苷为内参物的相对校正因子的测定

a、标准溶液的制备：

分别精密称取羟基红花黄色素A对照品、芍药苷对照品、阿魏酸对照品、苯甲酸对照品适量，置V₁体积容量瓶中，以50％甲醇水溶液为溶剂，溶解并定容至刻度，制得含羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、苯甲酸一定浓度的对照品混标浓溶液；将混标浓溶液进行七步梯度稀释，使得各步稀释后的标准溶液中各成分浓度分别在供试品限度浓度的40％、60％、80％、100％、120％、140％、160％。

b、各组分校正因子计算：

采用两台不同高效液相色谱仪，取步骤a中制得的7个不同浓度的标准溶液按步骤(1)给定色谱条件进样，记录色谱图。分别以各成分相对应的浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标，按最小二乘法进行线性回归，绘制标准曲线。将羟基红花黄色素A、阿魏酸、苯甲酸标准曲线的斜率分别除以芍药苷标准曲线的斜率，即为各成分相对芍药苷的校正因子。

(2)按校正因子法(一测多评法)测定供试品中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、苯甲酸含量：

a、对照品工作溶液制备：精密称取芍药苷对照品适量，置V₂体积容量瓶中，以50％甲醇水溶液为溶剂，制得含芍药苷C_R的对照品工作溶液。