[发明专利]苦杏仁苷的制备方法

说明书

本发明公开了一种制备苦杏仁苷的方法，包括如下步骤：S1、提取物制备：取苦杏仁药材为原料，粉碎过筛、灭酶、脱脂、过滤取滤渣、用酒精溶解、超声提取、过滤，滤液浓缩得到主含苦杏仁苷的提取物；S2、正相柱层析分离：以乙酸乙酯‑甲醇为洗脱溶剂、硅胶为填料进行正相柱层析分离所述苦杏仁苷的提取物，收集含有苦杏仁苷的洗脱溶剂，减压蒸馏得到苦杏仁苷粗品；S3、高速逆流色谱纯化：以乙酸乙酯‑正丁醇‑水为溶剂体系，经高速逆流色谱分离纯化苦杏仁苷。利用所述方法制备的苦杏仁苷纯度高，单次制备量大，并对样品活性无影响，也无外加污染，产品可用于药品，化妆品，保健品等。

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离纯化工艺领域，具体的，本发明涉及一种苦杏仁苷的制备方法。

背景技术

苦杏仁苷是苦杏仁的一种主要成分，具有镇咳平喘，抗肿瘤降血压以及抗凝血等作用，已经作为祛痰止咳，辅助性抗癌药物广泛用于医药领域，此外它还对气滞，肠燥便秘，水肿胀满等病症具有良好的临床治疗效果。目前，用于分离苦杏仁苷的方法大多为大孔树脂柱层析、正相柱层析及反相柱层析联用及结晶法。由于大孔树脂柱层析、正相柱层析及反相柱层析联用方法等方法制备样品得率低、制备量小、污染大、耗时长、成本高，无法进行规模化的制备，且在制备过程中因使用到大量的吸附填料，使样品原有的生物活性大打折扣，使制备得到的物质活性降低，生产效益低下，不适合推广使用。

发明内容

基于此，本发明在于克服现有技术的缺陷，提供一种苦杏仁苷的制备方法，利用所述方法制备出的苦杏仁苷纯度高，单次制备量大，并对样品活性无影响，也无外加污染，制备得到的样品可用于药品，化妆品，保健品等。

其技术方案如下：

一种制备苦杏仁苷的方法，包括如下步骤：

S1、提取物制备：取苦杏仁药材为原料，粉碎过筛、灭酶、脱脂、过滤取滤渣、用酒精溶解、超声提取、过滤，滤液浓缩得到苦杏仁苷的提取物；

S2、正相柱层析分离：以体积比为(70～90):(10～30)的乙酸乙酯-甲醇为洗脱溶剂、硅胶为填料进行正相柱层析分离所述苦杏仁苷的提取物，所述苦杏仁苷的提取物与洗脱溶剂的质量比为(1～5):(8～20)，收集含有苦杏仁苷的洗脱溶剂，减压蒸馏得到苦杏仁苷粗品；

S3、高速逆流色谱纯化：配制体积比为(0.5～1.5):(1～5):(1～4)的乙酸乙酯-正丁醇-水的溶剂体系，所述溶剂体系包括作为固定相的上层和作为流动相的下层，取适量所述流动相溶解所述苦杏仁苷粗品，将所述溶剂体系泵入高速逆流色谱的色谱柱中，然后将溶解后的苦杏仁苷粗品泵入高速逆流色谱洗脱分离，收集含有苦杏仁苷的流份，干燥得到苦杏仁苷，其中，所述高速逆流色谱的参数设置如下：转速为200～500rpm，分离温度为17～23℃，检测波长为240～260nm，流动相的流速为8～15ml/min。

本发明采用正相柱层析和高速逆流色谱联用的方法分离苦杏仁苷，先通过超声提取的方法从苦杏仁中获得苦杏仁苷提取物，将苦杏仁苷提取物进行正相柱层析，得到苦杏仁苷粗品，再使粗品通过高速逆流色谱分离纯化。由于高速逆流色谱不需要固体支撑体，苦杏仁苷的分离仅依据其在固定相、流动相中分配系数的不同就可实现，无需大量使用吸附填料，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使苦杏仁苷能够充分回收，回收的苦杏仁苷更能保持其本来的特性，且由于被分离的苦杏仁苷粗品与液态固定相之间能够充分接触，使得样品的制备量大大提高。

在其中一个实施例中，步骤S3中所述乙酸乙酯-正丁醇-水的溶剂体系中乙酸乙酯-正丁醇-水的体积比为1:2:3。

在其中一个实施例中，所述固定相保留值为70～85％。

在其中一个实施例中，步骤S3中所述流动相的流速为10～15mL。

在其中一个实施例中，步骤S3中所述转速为350～500rpm。