[发明专利]一种四肽荧光水凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：包括以下步骤：

a、制备四肽长链：采用固相合成四肽的方法，制备得到四肽长链，主要氨基酸序列包括(Fmoc-Lys(Alloc)-OH)-(Fmoc-Gly-OH)-(Fmoc-Phe-OH)-(Fmoc-Gly-OH)、(Fmoc-Lys(Alloc)-OH)-(Fmoc-Gly-OH)-(Fmoc-Asp(OtBu)-OH)-(Fmoc-Gly-OH)和(Fmoc-Lys(Alloc)-OH)-(Fmoc-Gly-OH)-(Fmoc-Arg(pbf)-OH)-(Fmoc-Gly-OH)；

b、制备荧光四肽长链分子：将步骤a得到四肽长链与罗丹明B在缩合剂Ⅱ作用下，制备得到荧光四肽长链分子；

c、制备四肽荧光水凝胶：将步骤b得到的荧光四肽长链分子作为大分子单体，加入活性稀释剂、小分子交联剂和光引发剂，紫外光固化制备得到荧光水凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的步骤a中制备四肽长链的具体过程为：四肽固相合成反应管中加入树脂，用哌啶的DMF溶液脱除氨基酸上的保护基团Fmoc，用DMF、DCM溶剂依次反复冲洗，在缩合剂Ⅰ作用下，将第一个Fmoc基团保护的氨基酸接到氨基树脂上，用哌啶的DMF溶液脱除氨基酸上的保护基团Fmoc，用DMF、DCM溶剂依次反复冲洗，如此不断接上其他三个的氨基酸。

3.根据权利要求2所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的树脂为氯甲基树脂、氨基树脂、羧基树脂，缩合剂Ⅰ为二环己基碳化二亚胺、N,N-二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺中的一种，缩合剂Ⅰ的加入量与当前活化的氨基酸的摩尔比为1～1.5:1。

4.根据权利要求2所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的树脂与第一个链接的氨基酸的摩尔比为1：2～5，下一个氨基酸与前一个氨基酸之间的摩尔比为1：1～2，哌啶的DMF溶液中哌啶的体积浓度为10～30％。

5.根据权利要求1所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述步骤b中制备荧光四肽长链的具体过程为：将四肽长链用DCM溶胀，称取罗丹明B溶解在DMF溶剂中，罗丹明B溶液中加入缩合剂Ⅱ，将混合溶液和溶胀的四肽长链加入四肽反应管中，反应，用DCM与DMF溶剂多次清洗，用切割液割除树脂以及氨基酸上的侧基保护基团，制备得到荧光四肽长链分子。

6.根据权利要求5所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的步骤b中的四肽长链和罗丹明B的反应摩尔比为1：1～3，缩合剂Ⅱ为二环己基碳化二亚胺、N,N-二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺中的一种，罗丹明B溶液的质量体积浓度为20～40％，反应温度为30℃，反应时间为30～90min，缩合剂Ⅱ加入的量与罗丹明B的反应摩尔比为1～1.5:1，切割液为三氟乙酸：三异丙基硅烷：二氯甲烷的体积比为20：1：1的混合溶液。

7.根据权利要求1所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的步骤c中制备荧光水凝胶的具体过程为：荧光四肽长链分子、活性稀释剂、小分子交联剂和光引发剂溶解在DMF溶剂中，紫外光固化制备得到荧光四肽水凝胶。

8.根据权利要求7所述的一种四肽荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的活性稀释剂为N-异丙基丙烯酰胺，小分子交联剂为N，N’-亚甲基双丙烯酰胺，光引发剂为1-羟基环己基苯基甲酮、安息香双甲醚、2-羟基-4-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮中的一种。

9.根据权利要求7所述的一种荧光水凝胶的制备方法，其特征是：所述的荧光长链四肽分子和N-异丙基丙烯酰胺的反应质量比为20～60％：80～40％，N，N’-亚甲基双丙烯酰胺的质量占荧光长链四肽分子和N-异丙基丙烯酰胺总质量的2～10％，光引发剂的质量占荧光长链四肽分子和N-异丙基丙烯酰胺总质量的2～10％，紫外光固化时间为10～30min。