[发明专利]黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌提高纤维素酶酶活的方法有效
| 申请号: | 201611160494.5 | 申请日: | 2016-12-15 |
| 公开(公告)号: | CN106754830B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
| 发明(设计)人: | 薛栋升;梁龙元 | 申请(专利权)人: | 湖北工业大学 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N1/14;C12N1/20;C12R1/685;C12R1/01 |
| 代理公司: | 42222 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 常海涛 |
| 地址: | 430068 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 碱纤维 单胞菌 菌丝 稻谷壳 黑曲霉 纤维素酶酶活 固定混合物 黑曲霉孢子 培养基 喷雾 单胞菌菌 纤维素酶 重复利用 薄膜层 固定的 混合物 菌丝膜 烘干 菌体 内核 上喷 吸附 洗净 过滤 | ||
1.一种黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌提高纤维素酶酶活的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)往洗净、烘干的稻谷壳上均匀喷雾浓度为0.8×107/mL-2×107/mL的粪碱纤维单胞菌菌液,喷雾量为100-300mL/kg;然后再均匀喷雾培养基,喷雾量为10-100mL/kg,20-35℃培养20-30h,得到粪碱纤维单胞菌固定的内核;
(2)往粪碱纤维单胞菌固定的内核上均匀喷雾浓度为0.8×107/mL-2×107/mL的黑曲霉孢子液,喷雾量为100-300mL/kg;然后再均匀喷雾培养基,喷雾量为10-50mL/kg,20-35℃培养8-12h,得到黑曲霉孢子与粪碱纤维单胞菌共同吸附在稻谷壳上的固定混合物;
(3)往固定混合物上喷雾培养基后继续培养,得到菌体继续培养的混合物;
(4)菌体继续培养的混合物接入到成菌丝膜培养基中进行培养,使稻谷壳外面形成菌丝薄膜层,得到黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌;所述的成菌丝膜培养基的配方为:胰蛋白胨0.1g,酵母提取物0.1g,氯化钠10g,PDA液体培养基100mL,水900mL;所得到的黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌进行培养,产生的纤维素酶酶活得到了提高。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中喷雾培养基的总量为40-80mL/kg,培养的条件为20-35℃培养2-3d。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)为:室温下,先往固定混合物上喷一次PDA液体培养基,培养12h后再喷一次PDA液体培养基,培养12h;翻面喷一次PDA液体培养基,培养12h后再喷一次PDA液体培养基,培养12h;每次喷雾量均为10mL/kg。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(4)中菌体继续培养的混合物接入到成菌丝膜培养基中的接入量为5-20g/1000mL;培养的条件为100-200r/m、20-35℃培养1-2d。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(4)为:菌体继续培养的混合物以10g/1000mL的接入量接入到成菌丝膜培养基中,140r/m、25℃培养36h,得到黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌。
6.一种黑曲霉菌丝包裹粪碱纤维单胞菌,其特征在于:通过权利要求1-5任一项所述的方法得到。
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