[发明专利]一种猪圆环病毒2型疫苗效力检验方法

权利要求书

1.一种猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验方法，其特征在于，步骤如下：

(1)小白鼠抗体水平测定

①小白鼠的免疫

将猪圆环病毒2型疫苗经皮下免疫小白鼠，10-21天后再按照相同的免疫途径和剂量进行加强免疫一次；

②小白鼠抗体水平的测定

加强免疫，14-28天后，处死小白鼠，采集并分离血清，测定抗体水平；

(2)通过测定小白鼠的抗体水平判断疫苗效力检验是否合格的方法

①免疫小白鼠抗体水平与免疫猪抗体水平，攻毒保护试验的结果之间具有平行关系；

②根据测定的小白鼠抗体水平判断该疫苗效力检验是否合格，所述检测小白鼠抗体水平大于1:400，做为样品疫苗检验合格的标准，即可以达到对猪群产生80％保护率。

2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验方法，其特征在于，步骤(1)中首次免疫的最佳时间为14天。

3.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验方法，其特征在于，步骤(1)中加强免疫的最佳时间为21天。

4.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验方法，其特征在于，步骤(1)中所述疫苗的免疫剂量为0.1-0.2ml，并且分4点免疫。

5.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型灭活疫苗效力检验方法，其特征在于，所述抗体水平的测定方法包括如下操作步骤，

①将待检血清用PBS做倍比稀释；

②加入已经包被PCV2Cap蛋白的ELISA酶标板中；

③放入37℃温箱，作用1h；

④弃去一抗，PBST洗涤；

⑤加入PBS稀释的HRP标记羊抗鼠IgG(二抗)，放入37℃温箱，作用1h；

⑥弃去二抗，用PBST洗涤；

⑦加入显色液进行显色；

⑧加入终止液终止显色；

⑨酶标仪读取OD₄₅₀，判定疫苗效力。