[发明专利]一种电致化学发光免疫传感器的制备、产品、检测及应用

权利要求书

1.一种基于CdTe@MOFs/CdTe QDs复合物的电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）依次用0.3、0.05 μm的氧化铝粉末对直径为4 mm的玻碳电极进行抛光，先用超纯水清洗干净，再分别在超纯水、乙醇、超纯水中超声洗涤，晾干备用；

2）在电极表面滴加5 μL，质量分数为20% ~ 25%的Au@TiO₂纳米复合物，室温下晾干得修饰电极；

3）在修饰电极表面滴加15 μL，质量分数为2% ~ 5%的抗体，4 ℃静置孵育，用超纯水漂洗，得到免疫电极；

4）在免疫电极表面滴加质量分数为0.25%牛血清白蛋白封闭非特异性活性位点，在37 ℃条件下孵育30 ~ 40分钟，取出，水洗，于室温下放置晾干于4 ℃保存；

5）将特异性抗原蛋白滴加在电极上用于捕捉抗体，于37 ℃反应40 ~ 60分钟，反应完成后用磷酸盐缓冲溶液冲洗去掉未结合的蛋白样品；

6）将CdTe@MOFs/CdTe QDs复合物标记的抗体共耦合物滴在电极上与抗原特异性识别，37 ℃下反应80 ~ 100分钟，用磷酸盐缓冲溶液洗涤3次以除去非特异性吸咐的共耦合物，于4 ℃保存备用。

2.根据权利要求1所述一种基于CdTe@MOFs/CdTe QDs复合物的电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于：所述Au@TiO₂纳米复合物的制备方法如下：

1）将四甲基氢氧化铵滴加到含有超纯水的两口圆底烧瓶中，将烧瓶在冰浴的条件下使溶液温度降至2 ℃，然后在剧烈搅拌的条件下将异丙醇钛的异丙醇溶液逐滴加至烧瓶中，滴加完后继续搅拌10 ~ 20分钟，撤去冰浴转为加热装置，在温度为90 ~ 100 ℃加热回流12 ~ 15小时；

2）将经步骤1）反应后的溶液转入反应釜中，在175 ℃条件下，反应4小时，自然冷却后离心得白色固体，用超纯水洗涤后分散于超纯水中于4 ℃下保存备用；

3）将1wt% 的HAuCl₄•4H₂O稀释到步骤2）制备的分散有白色固体的超纯水中，在剧烈的搅拌下，加入1wt% 柠檬酸钠，煮沸10 ~ 15分钟后继续搅拌15 ~ 20分钟，将溶液冷却并在4 ℃下储存得带负电荷的AuNPs；

4）将PDDA滴加到TiO₂溶液并在4 ℃下搅拌过夜，离心洗涤除去多余的PDDA，得到PDDA功能化的TiO₂溶液；

5）将步骤3）得到的带负电荷的AuNPs滴加到步骤4）得到的PDDA功能化的TiO₂溶液中并搅拌制备Au@TiO₂纳米复合物，将制得的Au@TiO₂纳米复合物离心，用超纯水洗涤2次除去过量的试剂得Au@TiO₂纳米复合物，重悬于超纯水中。