[发明专利]一种水蛭提取物及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201611018171.2 | 申请日： | 2016-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN108079022A | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 石佳媛 | 申请（专利权）人： | 石佳媛 |
| 主分类号： | A61K35/62 | 分类号： | A61K35/62;A61P7/02;A61P25/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 550001 贵州省贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水蛭提取物 制备 传统动物 超滤 可控 水蛭 血小板聚集作用 阴离子交换层析 神经保护作用 有机溶剂沉淀 分离技术 技术要求 加水匀浆 结合生物 抗凝作用 酶解技术 凝胶层析 提取物 腥臭 可用 酶解 溶栓 原粉 制药 肽类 应用 瓶颈 中药 | ||
1.一种水蛭提取物的制备方法，其特征在于：步骤如下：
(1)取水蛭干燥全体粉碎成30～120目粉末，加入8～15倍量的水，或取水蛭鲜活全体，加入1～5倍量的水，匀浆；
(2)取匀浆液，调整pH至7～9，按每1g底物加入2000～20000U酶的比例加入胰蛋白酶或/和胰酶，控制温度30℃～60℃，酶解2～12小时，冷却至室温；
(3)向上述酶解液中加入1～5倍体积的乙醇或/和丙酮冷藏沉淀1～2次，过滤，取滤液减压回收，残渣加水溶解，微孔滤膜过滤；
(4)将上述滤液通过分子截留量为5000Da的超滤膜，收集分子量小于5000Da的部分；
(5)将上述超滤液的pH调整至7.5～9.5，通过阴离子交换树脂，先用水或pH7～9、0.01～0.05mol/L的Tris-盐酸缓冲液或pH7～9、0.01～0.05mol/L的二乙醇胺-盐酸缓冲液冲洗，将冲洗液弃去，然后以0.1～2mol/L的氯化钠溶液洗脱，收集洗脱液，脱盐，浓缩，喷雾干燥或冷冻干燥即得到水蛭提取物。
2.根据权利要求1所述的水蛭提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)为：取水蛭干燥全体粉碎成80～100目粉末，加入9～13倍量的水；或用水蛭鲜活全体，加入2～4倍量的水。
3.根据权利要求1所述的水蛭提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)为：取匀浆液，调整pH为8～9，按每1g底物加入5000～10000U蛋白酶的比例加入胰蛋白酶或/和胰酶，控制温度45℃～55℃，酶解4～10小时，冷却至室温。
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