[发明专利]一种干细胞培养液及注射液

说明书

一种干细胞培养液，是由如下原料组成的：复方氨基酸注射液10%、注射用水溶性维生素1%、丙氨酰谷氨酰胺0.5%、人血白蛋白10%、水解蛋白注射液10%、微量元素注射液0.5%、勃脉力A液68%；pH值为6.8‑7.0，渗透压为310 mOsm/kg。采用所述干细胞培养液培养间充质干细胞，并收集间充质干细胞培养上清；将收集的培养上清经滤膜过滤，收集滤液，即为干细胞注射液。使用去细胞化的干细胞分泌因子进行静脉注射，有效避免了干细胞在伦理方面的争议；所述干细胞培养液，原料成分均属于临床级别，安全可靠，为干细胞生存环境提供营养，能有效促进干细胞分泌大量的细胞因子，保持干细胞活性，并且营养增补剂配方与干细胞分泌因子配合，能有效缓解机体亚健康状态，重现机体健康。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种间充质干细胞培养液及注射液。

背景技术

间充质干细胞（Mesenchymal stem cells）是一类具有多向分化潜能的成体干细胞，源于发育早期的中胚层，主要存在于结缔组织和器官间质中，可以从骨髓、外周血、脂肪及皮肤等多种组织中获得。间充质干细胞属于非终末分化细胞，它既有间质细胞的特征，又有内皮细胞及上皮细胞的特征；作为一类多能干细胞，它在体外特定的诱导条件下，可以向骨、软骨、肌肉、肌腱、肝、脂肪、神经、内皮及胰岛样细胞等方向增殖分化。

间充质干细胞培养过程中，会分泌干细胞因子（SCF）、表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血小板源性生长因子A（PDGF-A）、转化生长因子（TGF-β）、肝细胞生长因子（HGF）、白细胞介素（IL）、胰岛素样生长因子（IGF-Ⅱ）、巨噬细胞集落刺激因子（GSFs）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、干扰素（IFN）、神经生长因子（NGF）、以及细胞分泌的外泌体（Exosome）、载有功能性蛋白质、mRNA 及microRNA（miRNA）等物质。包含RNA分子这种复合细胞因子在人体内能够促进细胞增殖、分化和再生，加强新陈代谢，防止细胞衰老；介导机体细胞信号传导、活化机体干细胞，促进新毛细血管形成，进行生理性修复；调节机体亚健康，提高机体免疫清除损伤、病变、衰老的细胞。有研究表明，使用干细胞分泌因子及Exosome与使用干细胞具有相同的作用。因此，在细胞治疗中不使用细胞而使用细胞分泌因子的去细胞化的概念，受到越来越多的关注和支持，干细胞分泌因子与干细胞相比，优势明显。

细胞在体外的生长依赖于培养液，而干细胞直接将细胞因子分泌到培养液中，培养液的成分直接关系到细胞因子的临床使用。现阶段动物细胞的体外培养主要依赖于胎牛血清，这样细胞在体外才能较好的增殖生长。但由于胎牛血清成分复杂，使用含血清的培养基培养细胞存在潜在的细胞毒性作用、外源病毒和致病因子污染问题，使细胞培养的标准化和终产品纯化难度加大，异种血清的残留也易导致临床上的过敏反应。因此，无血清培养基的开发和应用势在必行。所谓无血清培养基，是指不含有动物血清或其他生物提取液，但仍可以维持细胞在体外较长时间生长、繁殖的一种培养基。