[发明专利]一种吉他霉素化学发光酶联免疫检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种高灵敏度、高准确度、高精确度的吉他霉素化学发光酶联免疫检测试剂盒，包括盒体、设在盒体内的酶标板和设在盒体内的试剂。通过大量试验筛选具有优良性质的特异性的单克隆抗体，以及确定反应液中各组分的合适浓度，本发明的吉他霉素化学发光酶联免疫检测试剂盒能够快速、精准的检测到较低含量的吉他霉素，适合于检测猪或禽类的动物性食品中对吉他霉素药物残留量检测需求。

技术领域

本发明涉及一种化学发光试剂盒，具体为一种用于检测吉他霉素的化学发光酶联免疫检测试剂盒。

背景技术

随着人们生活质量的提高，食品安全问题越来越为广大消费者所关注，特别是农药和抗生素等药物残留问题更是广大消费者所关注的焦点问题。在食品安全这个全球关注的热点问题上，如何快速、准确地检测食品安全的问题已成为重中之重。要检测抗生素在食品中的残留，必须选择特异性强、灵敏度高、高效快速的检测方法。因此，研究各种抗生素类残留检测的方法，提高其灵敏度与选择性具有十分重要的意义。

抗生素广泛应用于治疗人和动物的多种细菌性感染疾病。作为临床用药的抗生素类常常在短期内服用，主要是通过注射、口服、饮水等方式进入动物体内。在休药期结束前注射部位的肌肉和奶中会残留超量的抗生素。兽医在临床用药时，将不同的抗生素联合起来使用，也容易造成抗生素类药物在动物体内残留，导致动物性食品污染。有些抗生素类还被作为药物添加剂，用来预防动物细菌性疾病和促进动物生长而被长期使用。如土霉素添加剂、金霉素添加剂等经口腔进入动物体内，短时间不能完全排出，极易在体内蓄积，造成动物性食品中的抗生素残留。

现代养殖业的迅速发展引起的抗生素的滥用，进而导致的大量药物残留已经成为威胁人类健康的严重经济社会问题。动物源性食品中抗菌素污染的问题已引起全世界广泛关注，许多国家均对各种动物源性食品中的抗菌素残留提出限量标准。我国农业部在2002年公告的《关于动物性食品中兽药最高残留限量的通知》中，规定了92种动物性食品中兽药最高残留限量，其中吉他霉素(Kitasamycin)在猪/禽的肌肉、肝、肾组织中的最高残留限量为200μg/kg。吉他霉素又称柱晶白霉素,是由北里链霉菌产生的一种多组分大环内酯类抗生素，对多数革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌及霉形体均有较强抗菌活性，用于防治畜禽细菌感染和霉形体病等以及用作促生长剂，近年来，随着吉他霉素的广泛应用，其在动物性食品中的残留问题也日益突出。

因此，亟需建立能够快速、灵敏地检测吉他霉素残留的检测方法。目前已有一些监测方法，包括传统的仪器法，微生物检测法和新兴的酶联免疫检测法(ELISA)等。传统检测药物残留的仪器分析方法包括HPLC、LC-UV、LC-MS和LC-MS-MS等。这些方法优点是准确、稳定、特异性好，可以作为标准方法，但仪器设备昂贵，笨重，需要大量的溶剂，对操作人员要求很高，样品前处理复杂、费时、费力、不易普及，不适合对大规模的样品进行即时检测。微生物检测法虽然可以进行大量样品的即时检测，但是特异性差，不能进行准确的定性定量分析。酶联免疫检测法(ELISA)克服了以上方法的缺点，是一种快速、灵敏、方便的检测方法，可以用于大量样品的即时检测。

但市场对于提高检测方法的灵敏度、精准度总是有更高的需要。相对于普通的酶联免疫检测法，化学发光免疫分析(CLIA)是一种有着更高的灵敏度，更宽的线性范围，更适合药物残留检测的检测方法。它是将发光免疫分析和免疫反应相结合，而建立的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术，一种非放射性标记免疫分析技术。

目前已有相关技术的专利申请，例如申请号为CN201210049826.8，或CN201210049798.X等。但为了满足进一步降低检测限，提高检测方法的灵敏度，提高检测试剂盒的准确度、精密度的要求，需要进一步改进检测试剂盒以及检测方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，发明人筛选了不同的单克隆抗体，进行了大量的试验后，得到了一种具有良好效果的单克隆抗体，并在此基础上制备了一种具有高灵敏度、高特异性、且具有高反应速度、准确度和精密度的吉他霉素的化学发光酶联免疫检测试剂盒。