[发明专利]用于测定葡萄糖的试剂盒和方法

说明书

本发明涉及用于测定葡萄糖的试剂盒和方法。所述试剂盒包含试剂组1和试剂组2，所述试剂组1包含抗坏血酸氧化酶和色原，所述试剂组2包含4‑氨基安替比林、过氧化物酶和葡萄糖氧化酶，其中，所述色原是或者包含N‑乙基‑N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3,5‑二甲氧基苯胺或其钠盐。本发明的试剂盒和方法可以降低葡萄糖检测中由样品中存在的羟苯磺酸钙和/或酚磺乙胺所造成的干扰。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域。特别地，本发明涉及一种用于检测葡萄糖的试剂盒和方法，更具体地涉及一种主要用于全自动生化分析仪的葡萄糖测定试剂盒。

背景技术

葡萄糖(Glucose，Glu)是存在于人体血液中最主要的碳水化合物。血液中的葡萄糖(俗称血糖)是人类生命活动的必要物质，主要来源于食物经消化吸收生成。

葡萄糖(例如血糖)含量必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要，其含量测定对临床检测具有重要意义。一般情况下葡萄糖病理性增高主要见于各种糖尿病、甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能亢进、垂体前叶嗜碱性细胞功能亢进、颅外伤、颅内出血、脑膜炎、脱水引起高血糖等。葡萄糖病理性降低主要见于肾上腺皮质功能减退症、甲状腺功能减退症、严重肝病、过量使用降糖药物、尿毒症晚期，严重营养不良、肝脏疾病等。因此，临床检测血清葡萄糖浓度具有非常重要的参考价值和意义。

目前葡萄糖测定的方法有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法、邻甲苯胺法、葡萄糖氧电极法、同位素稀释质谱法等。其中葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖有较高的特异性、灵敏度和准确性，试剂稳定，价格适中，是当前全国临床检验中心推荐的常规方法。

葡萄糖氧化酶法的主要原理是：D-葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)的催化作用下氧化生成D-葡萄糖酸，并产生过氧化氢(H₂O₂)，H₂O₂偶联Trinder反应呈色。即H₂O₂与4-氨基安替比林(4-AAP)和色原性氧受体在过氧化物酶(POD)的作用下生成醌亚胺，其生成量与样本中的Glu含量成正比。反应式如下：

然而，在临床应用中发现一些药物或试剂(例如，羟苯磺酸钙和酚磺乙胺等)对酶法测定葡萄糖具有明显的干扰作用。例如，参见程涌江等，“酚磺乙胺对部分生化检验项目干扰的相关研究，《国际检验医学杂志》，2011年第11期。

羟苯磺酸钙(calcium dobesilate)(又称多贝斯(doxium))是一种微血管保护剂，主要用于治疗微血管病、静脉曲张综合症以及与微循环障碍伴发额静脉功能不全，还用于静脉剥离和静脉硬化法的辅助治疗，用于预防术后综合症，水肿及组织浸润，以及糖尿病性视网膜病的治疗和预防。

酚磺乙胺(又名止血敏)的化学名称为2,5-二羟基苯磺酸二乙胺盐。其能使血小板数量增加，并增强血小板的凝集和黏附力，促进凝血活性物质的释放，从而产生止血作用。酚磺乙胺在临床上主要用于预防和治疗外科手术出血过多，血小板减少性紫癜或过敏性紫癜以及其他原因引起的出血。

羟苯磺酸钙和酚磺乙胺对酶法检测葡萄糖的干扰对被施用这两种药物的患者造成很大的不便。例如，对于糖尿病患者而言，常伴发糖尿病视网膜病变、静脉曲张，而所施用的羟苯磺酸钙对酶法检测葡萄糖的干扰可能造成不能正确评估糖尿病患者的葡萄糖水平，从而掩盖并延误病情。而对于手术患者，所施用的酚磺乙胺对酶法检测葡萄糖的干扰可能使得不能正确评估其葡萄糖水平，造成术后并发症，影响患者的预后。因此，这种干扰作用严重影响检测结果的准确性，影响临床医生做出正确判断，最终延误患者治疗，或采用不合理治疗措施导致患者伤亡。

目前，市场上出售的酶法检测试剂盒普遍存在无法有效抵抗羟苯磺酸钙和酚磺乙胺干扰的缺陷。