[发明专利]检测牛乳中A1β‑酪蛋白及A2β‑酪蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法。

背景技术

牛奶中蛋白质主要有乳清蛋白和酪蛋白两大类，酪蛋白又分为β-酪蛋白、α-酪蛋白，κ-酪蛋白三种，其中β-酪蛋白约占蛋白总量的30％，β-酪蛋白有两种主要的变异型，即A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白。既含有A1β-酪蛋白又含有A2β-酪蛋白的牛乳为A1/A2型牛奶，只含有A2β-酪蛋白的牛奶为A2型牛奶，只含有A1β-酪蛋白的牛奶为A1型牛奶。

母乳中的β-酪蛋白与A2β-酪蛋白在结构和消化特点方面更为接近，而与A1型则相对差异较大。但是，目前发表的数据显示，若由于缺乏母乳而需使用配方奶喂养的婴儿，如采用不含A1β-酪蛋白的配方奶以及对年龄稍大的婴儿采用不含A1β-酪蛋白的奶制品可能有助于降低多种不良作用或反应的风险，由此可见，A2β-酪蛋白是自然亲和的牛奶蛋白质，有助于婴幼儿的长远健康。

由于不是所有的奶牛都能产出只含有纯净A2β-酪蛋白而不含有A1β-酪蛋白的牛奶，现今，西方的奶牛中只有约30％的奶牛是纯正的A2奶牛，由其所产的牛奶只含有100％纯净的A2β-酪蛋白。

然而，对于牛奶中A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白的检测方法仍有待研究。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出了一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法。利用该方法能够准确地检测出牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，且操作简便、快速。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

目前的鉴定手段主要集中于基因手段。然而，该方法操作复杂，检测成本较高。

有鉴于此，发明人经过大量实验发现，通过采用毛细管电泳法对牛奶进行检测，从而能够准确地检测出牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，且操作简便、快速。

为此，本发明提出了一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)将所述牛乳依次进行加热、离心、冷冻及解冻，以便得到待测储备液；(2)将所述待测储备液进行预处理，以便得到待测液，其中，所述预处理包括将所述待测储备液与预处理液进行混合；以及(3)利用毛细管电泳法对所述待测液进行检测，以便确定所述牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白。

发明人发现，利用毛细管电泳法能够确定牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，例如仅存在A1β-酪蛋白或A2β-酪蛋白，或者同时存在A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白。然而，由于牛奶中含有脂肪，脂肪可以很好的吸附于毛细管内壁表面而导致毛细管内部无法形成双电层，最终无法实现蛋白的有效分离，同时脂肪还容易导致毛细管阻塞而影响分离。此外，牛奶中的酪蛋白主要是以胶束的形式存在的，若直接进行毛细管电泳，各类型的酪蛋白之间无法分离，导致检测失败。为此，发明人经过大量实验发现，先将牛奶进行离心处理，以充分除去脂肪，避免脂肪对后续检测的影响。进一步地，离心之前，将牛奶进行加热，除脂肪效果较好。接着，通过将离心后的牛奶进行冷冻及解冻，以破坏酪蛋白胶束结构，从而游离出β-酪蛋白，以便于后续检测。进一步地，利用预处理液使酪蛋白胶束进一步分离，以充分游离出β-酪蛋白。由此，根据本发明实施例检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法能够准确地检测出牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，且操作简便、快速。

根据本发明的实施例，上述检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，所述加热是将所述牛乳加热至40～70℃。由此，以提高乳脂肪去除率。

根据本发明的实施例，所述离心是在1500～10000r/min下进行5～40分钟。由此，以充分除去乳脂肪。

根据本发明的实施例，所述冷冻是在-30～-40℃下进行5～60分钟。由此，以破坏酪蛋白胶束结构。

根据本发明的实施例，所述预处理液含有：30mmol/L的磷酸二氢钠；0.1质量％的羟丙基甲基纤维素；7mol/L的尿素；以及0.05质量％二硫苏糖醇，利用0.1mol/L的NaOH溶液调节所述预处理液的pH值至8.0。由此，以进一步破坏酪蛋白胶束结构。

根据本发明的实施例，利用未涂层毛细管对所述待测液进行所述检测。由此，以降低检测成本。