[发明专利]检测牛乳中A1β‑酪蛋白及A2β‑酪蛋白的方法

权利要求书

1.一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法，其特征在于，包括：

(1)将所述牛乳依次进行加热、离心、冷冻及解冻，以便得到待测储备液；

(2)将所述待测储备液进行预处理，以便得到待测液，其中，所述预处理包括将所述待测储备液与预处理液进行混合；以及

(3)利用毛细管电泳法对所述待测液进行检测，以便确定所述牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，

其中，所述预处理液含有：

30mmol/L的磷酸二氢钠；

0.1质量％的羟丙基甲基纤维素；

7mol/L的尿素；以及

0.05质量％二硫苏糖醇，

利用0.1mol/L的NaOH溶液调节所述预处理液的pH值至8.0。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述加热是将所述牛乳加热至40～70℃。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述离心是在1500～10000r/min下进行5～40分钟。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述冷冻是在-30～-40℃下进行5～60分钟。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，利用未涂层毛细管对所述待测液进行所述检测。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤(3)包括：

将所述未涂层毛细管进行活化处理，并利用动态涂层试剂将活化后的未涂层毛细管进行涂层处理，得到具有动态涂层的毛细管；以及

利用所述具有动态涂层的毛细管进行检测。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述动态涂层试剂含有：

200mmol/L的三羟甲基氨基甲烷；

60mmol/L的戊二胺；

120mmol/L的十六烷基溴化铵；以及

80mmol/L的聚乙二醇，

利用0.1mol/L的HCl溶液调节所述动态涂层试剂的pH值至3.0。

8.根据权利要求6所述方法，其特征在于，

所述活化处理包括：

用色谱级甲醇冲洗所述未涂层毛细管内壁5～20分钟，再用去离子水冲洗5～20分钟，接着用1～4mol/L NaOH溶液冲洗5～20分钟，静置5～30分钟，最后用去离子水冲洗5～20分钟，

所述涂层处理包括：

用0.1～0.5mol/L的NaOH溶液冲洗所述活化后的未涂层毛细管内壁3～5分钟，再用去离子水冲洗3～5分钟，接着用所述动态涂层试剂冲洗3～10分钟，静置5～10分钟，最后用缓冲溶液冲洗3～5分钟。

9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述检测条件包括：

检测波长为200～450nm；

检测温度为0～40℃；

进样方式为压力进样或真空进样；

进样时间为1～20s；

工作电压为5～30kv；

检测频率为4～18Hz；

毛细管长度为30～100cm；

毛细管内径为25～75μm。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述进样方式为压力进样，压力为0～1psi。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述压力为0.5psi。

12.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述工作压力为20～30kv。

13.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述毛细管长度为60cm。

14.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述检测温度为25℃。