[发明专利]一种南极磷虾非酚性弱碱性生物碱的提取及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种南极磷虾非酚性弱碱性生物碱的提取及检测方法，属食品、药品和化工领域。

背景技术

南极磷虾(Euphausia superba Dana)，隶属节肢动物门、甲壳纲、磷虾目，体型较小，一般体长约5.5～6.0cm，体重约2g左右。以浮游植物为食的南极磷虾是鲸、海豹、企鹅等肉食动物的主要食物，也是南极食物链中的基础。南极磷虾是地球上数量最大繁衍最成功的单种生物资源之一，其生物蕴藏量约为6.5×10⁸～10×10⁸吨，最新估算量为3.79×10⁸吨。在粮食短缺，世界渔业资源萎缩，尤其是中国近海渔业开发过度的情况下，南极磷虾无疑是一种具有巨大开发潜力的境外渔业资源。南极磷虾营养丰富，富含活性物质。南极磷虾蛋白及酶类、虾青素、甲壳素等均已有研究报道。随着南极磷虾研究的深入，南极磷虾产品也由初级的饲料虾粉等向高端的保健、医药领域发展。加快南极磷虾研究进度有利于我国在南极磷虾产业方面占据优势地位。

生物碱主要来自于植物，又称植物碱，具有镇痛、缓解痉挛、抗菌、消炎、降血压、平喘、抗肿瘤等功效。动物源的生物碱除了两栖类动物外，只在一些海洋生物，如海绵、珊瑚、海洋微生物以及口蛄虾中存在，其中口蛄虾生物碱的结构还未确定。海洋生物因其特殊的生存环境而有不同于陆生生物的代谢途径，一直是发现新药先导的的天然宝库。世界上有70％的药物来源于海洋。南极磷虾中生物活性物质丰富，与其生存的低温、低盐的特殊海洋生存环境不无关系。虽有推测南极磷虾中含有生物碱，但并未清楚生物碱的种类，而且目前关于南极磷虾中的生物碱还未有相关文献或专利报道。因此，研究南极磷虾生物碱的种类以及生物碱的提取及检测方法，对南极磷虾资源的开发利用具有十分重要的意义。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种南极磷虾非酚性弱碱性生物碱的提取及检测方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

本发明的第一个目的是提供一种南极磷虾非酚性弱碱性生物碱的提取方法，步骤如下：

(1)将南极磷虾与甲醇接触而进行提取，过滤，得滤液；滤液蒸发浓缩得到甲醇膏；

(2)将步骤(1)中的甲醇膏与乙醚接触而进行浸提，过滤，得乙醚液；乙醚液蒸发后得到乙醚浸膏；

(3)将步骤(2)中的乙醚浸膏与乙醚接触而进行溶解，得乙醚浸膏液，使其与酸水溶液接触而进行萃取，萃取得到酸水相；

(4)将步骤(3)中的酸水相与氯仿接触而进行萃取，分离得到氯仿层A；

(5)将步骤(4)中的氯仿层A与氢氧化钠水溶液接触而进行萃取，分离得到碱水层和氯仿层B；

(6)将步骤(5)中的氯仿层B蒸发除去溶剂，即得到南极磷虾非酚性弱碱性生物碱样品。

步骤(1)中，南极磷虾在接触甲醇提取前先经过冷冻干燥处理。由于南极磷虾体内的酶具有很高的活性，南极磷虾被捕捞后，其体内的内源消化酶能高活性的降解蛋白质，使死亡后的组织快速分解，加速了南极磷虾的自溶、腐败和变质；通过对南极磷虾进行冷冻干燥预处理，能够防止南极磷虾自溶，有效的保持南极磷虾的品质。

步骤(1)中，所述南极磷虾与甲醇加入量的比为1g:(6-10)mL，提取温度为75～85℃，优选80℃，甲醇提取的次数为7-9次，每次浸提的时间为1-2h，提取方式可以为回流提取或搅拌提取。甲醇回流提取的次数选为7-9次，能够尽可能多的分离提取出非酚性弱碱性生物碱。

步骤(2)中，所述甲醇膏与乙醚加入量的比为1g:(4-6)mL，加入乙醚浸提的次数为 4-6次，每次浸提的时间为0.5-1h。乙醚的提取次数选为4-6次，不仅有效分离出南极磷虾中的非酚性弱碱性生物碱，还能尽量减少提取次数的增加所带来的能源浪费。

步骤(3)中，不同条件所得乙醚浸膏量不同，乙醚复溶时加入乙醚的量可以根据实际情况进行调整。一般所述乙醚浸膏与乙醚的加入量比为1g：8～12mL(优选1g:10mL)，乙醚膏先用适量乙醚溶解，再与酸水萃取，可以增加与酸水的接触面积，保证碱性物质充分溶于酸水层。

乙醚很容易旋蒸，即便全部整除，花费的时间也较短。其次实验发现，用旋蒸保留的乙醚不能使乙醚浸提物全部溶解。