[发明专利]肺炎支原体荧光定量引物及探针、检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201610438682.3 | 申请日： | 2016-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN107513558A | 公开（公告）日： | 2017-12-26 |
| 发明（设计）人： | 柳辉 | 申请（专利权）人： | 深圳康美生物科技股份有限公司;北京康美天鸿生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙)44285 | 代理人： | 王仲凯 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肺炎 支原体 荧光 定量 引物 探针 检测 方法 试剂盒 | ||
1.肺炎支原体荧光定量检测引物组，其特征在于，包括如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的上游引物和如SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的下游引物。
2.肺炎支原体荧光定量检测探针，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
3.根据权利要求2所述的肺炎支原体荧光定量检测探针，其特征在于，3’端标记有MGB淬灭基团；5’端标记有6-FAM发光基团。
4.肺炎支原体检测试剂盒，其特征在于，包括：SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的上游引物、SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的下游引物，和SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的探针。
5.根据权利要求4所述的肺炎支原体检测试剂盒，其特征在于，还包括样品处理液；所述样品处理液中包括以下浓度的组分：
6.根据权利要求4所述的肺炎支原体检测试剂盒，其特征在于，所述上游引物、下游引物和探针存在于PCR反应液A中；
所述PCR反应液A中包括：PCR Buffer、MgCl2、dNTP/dUTP、BSA、上游引物、下游引物和探针。
7.根据权利要求4所述的肺炎支原体检测试剂盒，其特征在于，还包括PCR反应液B、阴性对照和阳性对照；
所述PCR反应液B中包括：Taq DNA聚合酶和UDG酶；
所述阴性对照包括Tris-Hcl和EDTA；
所述阳性对照为肺炎支原体质粒。
8.肺炎支原体的检测方法，其特征在于，包括：以如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的上游引物、如SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的下游引物扩增待测样品，以如SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的探针检测，经荧光定量PCR获得荧光信号。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品经过前处理，所述前处理为将待测样品以碱处理后，离心留取沉淀与样品处理液混合100℃处理10min后，离心留取上清液。
10.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述real-time PCR检测的程序为：
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